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dragonflydan

金虫 (初入文坛)

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9楼: Originally posted by shijunyu0618 at 2012-08-03 10:16:25
小孩,MTT可是个技术活。不是几次就能成功地!

是啊 做了好多次了,头都大了,还是不行,影响下一步纯化,压力大啊
只有想不到,没有做不到!加油@
11楼2012-08-03 10:31:46
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ppsfxn

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是CTLL-2细胞么?有看过文献说是CTLL-2细胞要样3-4周才能对IL-2有反应,当然实际上不用那么久,我这边做过实验,大概2-3周就有反应了;

另外一个很严重的问题是你的基础培养基是有含血清的吗?我最初做IL-2也是因为稀释液没加血清,结果24h细胞基本全死了,后来加血清稀释就好了,96孔板对细胞因子吸附挺严重的,血清可以减少大部分的吸附,你可以加10%FBS到你的稀释液和细胞培养液再重复一次试试。希望对你有帮助。
12楼2012-08-03 16:29:44
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dragonflydan

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
12楼: Originally posted by ppsfxn at 2012-08-03 16:29:44
是CTLL-2细胞么?有看过文献说是CTLL-2细胞要样3-4周才能对IL-2有反应,当然实际上不用那么久,我这边做过实验,大概2-3周就有反应了;

另外一个很严重的问题是你的基础培养基是有含血清的吗?我最初做IL-2也是因 ...

是CTLL-2细胞,基础培养基一直是加10%FBS的
只有想不到,没有做不到!加油@
13楼2012-08-04 11:08:32
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sxndliujing

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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7楼: Originally posted by dragonflydan at 2012-08-02 16:40:43
MTT避光,也没有细菌污染,用SDS代替DMSO还要吸干净吗...

我只用过DMSO,看文献SDS也是要弃掉的,你下次可以试试。
我爱科学
14楼2012-08-04 14:12:18
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ppsfxn

金虫 (小有名气)

引用回帖:
13楼: Originally posted by dragonflydan at 2012-08-04 11:08:32
是CTLL-2细胞,基础培养基一直是加10%FBS的...

你用的是标准品么还是自己生产的样品?如果是样品,建议你上标准品试试,可能是样品没活性也不一定
15楼2012-08-06 11:53:50
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dragonflydan

金虫 (初入文坛)

???????:
15?: Originally posted by ppsfxn at 2012-08-06 11:53:50
???????????????????????????????????????????????????????????????????????????...

???????????????????????????MTT????????????????????????????????????????
只有想不到,没有做不到!加油@
16楼2012-08-06 12:15:13
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dragonflydan

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
14楼: Originally posted by sxndliujing at 2012-08-04 14:12:18
我只用过DMSO,看文献SDS也是要弃掉的,你下次可以试试。...

好的,谢谢
只有想不到,没有做不到!加油@
17楼2012-08-06 12:15:34
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ppsfxn

金虫 (小有名气)

???????:
16?: Originally posted by dragonflydan at 2012-08-06 12:15:13
???????????????????????????MTT????????????????????????????????????????...

???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????95%???????4%Triton X-100??1%??????????Ч??????????????????
18楼2012-08-06 15:41:55
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dragonflydan

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
18楼: Originally posted by ppsfxn at 2012-08-06 15:41:55
有图不?是不是你的溶解液有问题?有一次用别人的溶解液,结果产生沉淀了,建议检查一下你用的溶液;我用的是细胞裂解液:95%异丙醇、4%Triton X-100、1%浓盐酸,溶解甲瓒效果挺好的,就是需要吹打。...

我们的溶解液是10%SDS-0.01mol/L HCl,溶解效果挺好的
只有想不到,没有做不到!加油@
19楼2012-08-07 14:50:45
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ppsfxn

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

数据发出来看下啊,图有么?
20楼2012-08-09 12:18:58
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