应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 感受态细胞提取的质粒酶解后为什么带型不一样？
52/1返回列表
查看: 3013  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

jackiey2

铜虫 (正式写手)

[交流] 感受态细胞提取的质粒酶解后为什么带型不一样？ 已有7人参与

有个问题始终想不明白
重组质粒带有氨苄抗性基因。重组质粒导入感受态细胞后铺带氨苄的平板，长出来的菌落应该都是成功摄入重组质粒的吧？挑出来若干个单菌落扩大培养后提取质粒，用限制酶进行酶切，为什么切出来的带有的还不一样呢？
新手做分子，望高手解惑，谢谢。

[ Last edited by jackiey2 on 2012-7-30 at 09:16 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
遗传
1楼 2012-07-30 08:57:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

史前五百年

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
假阳性，重新做下吧
赞一下 回复此楼
13楼2013-07-26 09:38:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

dshlove

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
不知道你说的条带不一样是什么意思，不知道你用的什么酶，质粒中某种酶的酶切位点不止一个，所以有可能切出不同大小的片段
赞一下 回复此楼
2楼2012-07-30 09:30:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jackiey2

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dshlove at 2012-07-30 09:30:07
不知道你说的条带不一样是什么意思，不知道你用的什么酶，质粒中某种酶的酶切位点不止一个，所以有可能切出不同大小的片段

用一种酶（KnoI），查重组质粒图谱，有两个切点。挑十个单菌落，扩大培养提质粒，用KnoI酶切，电泳条带不一样。
赞一下 回复此楼
遗传
3楼2012-07-30 15:52:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dshlove

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by jackiey2 at 2012-07-30 15:52:42
用一种酶（KnoI），查重组质粒图谱，有两个切点。挑十个单菌落，扩大培养提质粒，用KnoI酶切，电泳条带不一样。...

你是说，你提取的十个质粒，用酶切完之后，跑胶的条带不一致？
这样情况，我建议你先把你的质粒跑胶看看，因为有时候质粒也有可能不纯，导致你后续酶切，条带不一致。
赞一下 回复此楼
4楼2012-07-30 16:12:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭