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landscape37

新虫 (小有名气)


[交流] 柠檬酸合酶聚集沉淀实验

请教:最近在做柠檬酸合酶的聚集实验,买的是sigma的柠檬酸合酶,看资料说是柠檬酸合酶在43度条件下即可聚集沉淀。我做的具体条件是:预热仪器到45度,在Tris盐缓冲液中柠檬酸合酶的终浓度为0.5mM和1mM,取200ul于96孔板,同时以空白缓冲液做好对照(同时为防止加热蒸发浓度改变,我尽可能在样品周围都加了空白缓冲液),置于预热45度的仪器中,在400nm波长下读取40min内的吸光值。看文献上的结果吸光值应该是一个逐渐上升的过程,但是我的结果不是,无论是空白缓冲液还是有柠檬酸合酶的样品在40min中内都是一个值。真讨厌做蛋白实验!真心 败了 疯了
求有经验的高手答疑!
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凤凰-涅磐

金虫 (著名写手)



landscape37(金币+1): 谢谢参与
越深究一些东西,越感觉自己知道的太少,知识是我们一辈子都学不完的。
20楼2012-07-24 07:55:23
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mrzouhao

木虫之王 (文坛精英)



landscape37(金币+1): 谢谢参与
无论是空白缓冲液还是有柠檬酸合酶的样品在40min中内都是一个值——一定是测定仪器问题

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

24楼2012-07-24 08:25:16
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landscape37

新虫 (小有名气)


送鲜花一朵
引用回帖:
24楼: Originally posted by mrzouhao at 2012-07-24 08:25:16
无论是空白缓冲液还是有柠檬酸合酶的样品在40min中内都是一个值——一定是测定仪器问题

仪器应该没什么问题吧,测蛋白浓度时做BSA标准曲线都挺正常的
30楼2012-07-24 10:40:09
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landscape37(金币+1): 谢谢参与
这个不知道
10楼2012-07-23 16:00:00
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landscape37

新虫 (小有名气)



继续等
12楼2012-07-24 02:42:14
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nicer

至尊木虫 (知名作家)



landscape37(金币+1): 谢谢参与
看文献
16楼2012-07-24 05:40:24
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mlanqiang

木虫之王 (文学泰斗)



landscape37(金币+1): 谢谢参与
blessing
19楼2012-07-24 07:38:08
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简单回复
flyxu2楼
2012-07-23 13:46   回复  
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2012-07-23 13:55   回复  
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郑克宁6楼
2012-07-23 15:08   回复  
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yaoyao1459楼
2012-07-23 15:40   回复  
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假大空11楼
2012-07-23 16:47   回复  
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fengmeiyi13楼
2012-07-24 02:49   回复  
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Scifinder214楼
2012-07-24 03:09   回复  
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wenbin990315楼
2012-07-24 05:18   回复  
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userhung17楼
2012-07-24 07:10   回复  
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lauysche18楼
2012-07-24 07:33   回复  
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20091262222楼
2012-07-24 08:11   回复  
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祝福
zlh80052223楼
2012-07-24 08:16   回复  
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b72925楼
2012-07-24 08:30   回复  
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幸福XXX26楼
2012-07-24 09:15   回复  
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xachenxi27楼
2012-07-24 09:20   回复  
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