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柠檬酸合酶聚集沉淀实验
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请教：最近在做柠檬酸合酶的聚集实验，买的是sigma的柠檬酸合酶，看资料说是柠檬酸合酶在43度条件下即可聚集沉淀。我做的具体条件是：预热仪器到45度，在Tris盐缓冲液中柠檬酸合酶的终浓度为0.5mM和1mM，取200ul于96孔板，同时以空白缓冲液做好对照（同时为防止加热蒸发浓度改变，我尽可能在样品周围都加了空白缓冲液），置于预热45度的仪器中，在400nm波长下读取40min内的吸光值。看文献上的结果吸光值应该是一个逐渐上升的过程，但是我的结果不是，无论是空白缓冲液还是有柠檬酸合酶的样品在40min中内都是一个值。真讨厌做蛋白实验！真心 败了 疯了 求有经验的高手答疑！ |
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16楼2012-07-24 05:40:24