应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 大家帮我分析一下质粒电泳图
91/1返回列表
查看: 3310  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

tzaixmc

木虫 (正式写手)

[求助] 大家帮我分析一下质粒电泳图 已有1人参与

该质粒我是挑取的做克隆连接转化时的篮斑，就是载体pUCM-T的自连菌株然后培养提取的质粒，pUCM-T大小为2773bp。电泳图从左到右分别是DL5000，质粒，质粒HindⅢ单酶切，DL5000。DL5000从上到下的条带大小分别是5000，3000，2000，1500,1000.....。如果该质粒不是假阴性，为什么单酶切的条带在2700左右，而质粒的线性分子（质粒泳道中间条带）还大于5000呢？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

分子生物学

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-07-22 19:49:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

0008meng

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
会不会是质粒的纯度不够？
赞一下 回复此楼
2楼2012-07-22 20:50:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

0008meng

至尊木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 0008meng at 2012-07-22 20:50:18
会不会是质粒的纯度不够？

我这方面也不太懂？这个图确实有点怪？
赞一下 回复此楼
3楼2012-07-22 20:51:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的电泳图条带都成笑脸了，说明你的电泳液时间太久了。应该更换新的电泳缓冲液了。另外，质粒提得最好的就是出现3条带。我认为你单酶切后是单一条带，而且大小也对应该就是没有问题的。
赞一下 回复此楼
4楼2012-07-22 21:04:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tiani_tan

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
跑质粒应该用的是超螺旋marker，但你质粒的分子量大小确实不太对。质粒应该比线性的快才对啊。很奇怪
赞一下 回复此楼
5楼2012-07-23 12:12:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tzaixmc

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by tiani_tan at 2012-07-23 12:12:10
跑质粒应该用的是超螺旋marker，但你质粒的分子量大小确实不太对。质粒应该比线性的快才对啊。很奇怪

就是很纳闷，按理来说质粒单酶切应该和质粒三条带的中间一条在同一位置才对啊，高手出来解答一下啊。并且还有一点很奇怪的是质粒单酶切的那条带电泳时间短的时候比3000bp大，但是延长电泳时间就比3000bp小了，就是在2700左右的位置
赞一下 回复此楼
6楼2012-07-23 16:05:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tiani_tan

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by tzaixmc at 2012-07-23 16:05:20
就是很纳闷，按理来说质粒单酶切应该和质粒三条带的中间一条在同一位置才对啊，高手出来解答一下啊。并且还有一点很奇怪的是质粒单酶切的那条带电泳时间短的时候比3000bp大，但是延长电泳时间就比3000bp小了，就是 ...

这幅图上看的结果应该是酶切得片段条带要小于300bp，电泳时间短估计是没有跑开
赞一下 回复此楼
7楼2012-07-23 20:32:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuweifeng710

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

个人认为都没回答到点上，会有三条带是因为提取的质粒可能会有三种状态，开环的、线性的、超螺旋的，电泳图上超螺旋跑在最前端、再来是线性、最慢是开环。线性的不能再复制，但可以与参考marker大小，一般超螺旋含量越多提取质量越好，所以第二个样提取质量应该还不错
赞一下 回复此楼
8楼2016-01-18 10:06:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuweifeng710

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by wuweifeng710 at 2016-01-18 10:06:11
个人认为都没回答到点上，会有三条带是因为提取的质粒可能会有三种状态，开环的、线性的、超螺旋的，电泳图上超螺旋跑在最前端、再来是线性、最慢是开环。线性的不能再复制，但可以与参考marker大小，一般超螺旋含量 ...

不好意思，好像离题了
赞一下 回复此楼
9楼2016-01-18 10:09:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 tzaixmc 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 320求调剂0856 +3 不想起名字112 2026-03-19 3/150 2026-03-19 22:53 by 学员8dgXkO
[考研] 288求调剂 +15 于海海海海 2026-03-19 15/750 2026-03-19 22:41 by 学员8dgXkO
[考研] 0703化学调剂 ，六级已过，有科研经历 +12 曦熙兮 2026-03-15 12/600 2026-03-19 19:42 by maocaozhuxi
[考研] 288求调剂，一志愿华南理工大学071005 +5 ioodiiij 2026-03-17 5/250 2026-03-19 18:22 by zcl123
[考研] 0703化学调剂 +4 18889395102 2026-03-18 4/200 2026-03-19 16:13 by 30660438
[考研] 一志愿福大288有机化学，求调剂 +3 小木虫200408204 2026-03-18 3/150 2026-03-19 13:31 by houyaoxu
[考研] 085600材料与化工求调剂 +6 绪幸与子 2026-03-17 6/300 2026-03-19 13:27 by houyaoxu
[考研] 346求调剂[0856] +3 WayneLim327 2026-03-16 6/300 2026-03-19 11:21 by WayneLim327
[考研] 材料专硕英一数二306 +5 z1z2z3879 2026-03-18 5/250 2026-03-19 07:43 by BruceLiu320
[考研] 0703化学调剂，求各位老师收留 +10 秋有木北 2026-03-14 10/500 2026-03-19 05:52 by anny19840123
[考研] 330求调剂 +3 小材化本科 2026-03-18 3/150 2026-03-18 21:55 by 无懈可击111
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +5 梨花珞晚风 2026-03-17 5/250 2026-03-18 14:49 by haxia
[考研] 一志愿西南交大，求调剂 +4 材化逐梦人 2026-03-18 4/200 2026-03-18 14:22 by 007_lilei
[考研] 070300化学319求调剂 +6 锦鲤0909 2026-03-17 6/300 2026-03-18 13:22 by Iveryant
[考研] 0854，计算机类招收调剂 +3 胡辣汤放糖 2026-03-15 6/300 2026-03-18 12:09 by 上岸上岸……..
[考研] 326求调剂 +5 上岸的小葡 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:26 by ruiyingmiao
[考研] 308求调剂 +4 是Lupa啊 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:12 by ruiyingmiao
[考研] 085601求调剂 +4 Du.11 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:08 by ruiyingmiao
[考研] 药学383 求调剂 +3 药学chy 2026-03-15 4/200 2026-03-16 20:51 by 元子^0^
[考研] 330求调剂 +3 ?酱给调剂跪了 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:13 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭