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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 拟南芥茎的石蜡切片
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lilong414

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1楼 2012-07-19 19:54:42
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saintoy

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
95%过夜早泡碎了，70过夜，第二天85,95,100；再透明，浸蜡，，你脱水和透明的步骤出了问题，浸蜡应该没问题，还有可能就是注意脱水透明的时间，可以试试适当缩短一点点时间，祝你好运！
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saintoy@163.com
5楼2012-07-21 00:18:15
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普通回帖

nanwuweizi

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可能浸蜡不充分，考虑在包埋之前，延长在石蜡中的时间。
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2楼2012-07-19 23:08:12
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eargle

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
原因还是很多的：出现破碎：1.脱水没有脱干净，石蜡没有完全浸入细胞中；
                          2.在高浓度脱水剂中时间过长，组织被破坏；
                          3.浸蜡温度过高或梯度浸蜡方法不对。
  当然，你最好把你的制做条件说一下，我可以帮你看看，再告诉你具体要怎么改。
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3楼2012-07-20 09:38:44
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lilong414

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4楼2012-07-20 19:32:31
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shangdee

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个流程和我的差异太大，脱水一般就1-2小时，你这个95%的还过夜，真不靠谱，不知道看的是哪个参考书的。
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6楼2012-07-21 10:18:42
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shangdee

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

另外，我们石蜡处理都是60度，不知道你37度怎么让蜡融解的？
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7楼2012-07-21 10:20:09
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eargle

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

1、你选取的材料是7-8周的茎的第一和第二节间，材料应该比较软。
2、你选用的FAA含70%乙醇，不要先用70%乙醇洗，要先用水冲洗2小时，然后用15%乙醇2小时---30%乙醇3小时---50%乙醇3小时---70%乙醇过夜---80%乙醇2小时---95%乙醇1.5小时---100%乙醇40min---然后透明阶段:100%乙醇：二甲苯=3：1处理一个半小时-----100%乙醇：二甲苯=1：1一个小时---纯二甲苯处理2次，各半小时。你的脱水条件，95%过夜肯定不行的，会把组织破坏的。
3.浸蜡阶段：二甲苯中加入碎石蜡（碎石蜡慢慢加到饱和）可以浸一个小时就行，过长蜡反而不容易进入组织中;然后换到低熔点石蜡中4个小时----高熔点石蜡12小时。（浸蜡温度在58~60度）
注：你做的茎的切片不像根的切片，因为它的表皮常比内组织要硬得多，还有蜡质层，所以时间会长点。希望会对你有所帮组吧。
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8楼2012-07-21 21:42:37
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xdx520

木虫 (正式写手)

仙素

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般都是70%的酒精过夜的，95%的酒精过夜是不是对材料有影响，具体我没有做过，不敢妄下结论，还有浸蜡的时候，一开始我都是用低熔点蜡40度过夜的，第二天早上调到60度浸2个小时，然后倒掉低熔点蜡，换成高熔点蜡，这样浸3次，一次2个小时，就差不多了，希望对你有帮助
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9楼2012-07-22 12:21:04
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lilong414

禁虫 (初入文坛)
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10楼2012-07-26 19:48:28
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