| 查看: 4610 | 回复: 10 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
co-IP 条带问题
|
|||
|
我做co-IP Input IgG 抗目的蛋白 三条泳道均出现条带 拿了师姐的一组已知相互作用的蛋白来做也是这种情况 不知道哪里出了问题 希望做过的交流讨论一下 |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有257人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
求助，关于CO-IP的一些问题！！
已经有5人回复- 【分享】[03-10]精挑细选绿色软件推荐下载[清清心整理]【已搜索无重复】
已经有3人回复
- 【分享】[07-27]绿色免费精品软件下载[清清心整理]【已搜索无重复】
已经有3人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
桂林理工大学材料科学与工程学院诚聘青年教师
+1/123
-
双面压敏硅胶胶带
+2/90
-
加拿大/英属哥伦比亚大学曹彦凯课题组招收全奖博士/博后 [机器学习/优化/控制方向]
+1/83
-
南京大学自旋全国重团队陆显扬课题组招聘博士后
+2/44
-
南昌大学药学博士招生
+1/37
-
QS TOP100英国南安普顿大学数字健康与生医工招博后，博士，Fellowship，访问学者
+1/32
-
双一流大学湘潭大学“化工过程模拟与强化”国家地方联合工程研究中心招收各类博士生
+1/31
-
HBI的合成交流
+1/19
-
2026年博士申请-全固态锂金属电池方向-聚合物电解质+硫化物电解质
+1/12
-
博士/硕士招生
+1/9
-
限广州，征女友
+2/8
-
意大利CSC机器人方向博士招生
+1/7
-
诚招博士后及研究人员
+1/5
-
大连工业杰青、长江团队-生物质材料方向招收2026级博士生
+1/5
-
国家纳米科学中心鄢勇课题组26年博士招生
+1/5
-
西湖大学李小波课题组诚聘博士后3名（生物学方向）
+1/4
-
哈工大周宗尧课题组（院士团队） 招聘分离膜、环境水处理等方向博士后
+1/4
-
深圳先进院三院院士成会明团队诚聘液流电池/高分子合成等方向博后、科研助理、工程师
+1/3
-
国家纳米科学中心王振兴课题组招收申请考核制博士研究生
+1/3
-
上海交通大学李婉露课题组博士后招聘（神经生物学/器官芯片/类器官方向）
+1/2
6楼2012-07-22 15:27:08
★ ★ ★
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流经验 2012-07-19 15:19:16
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流经验 2012-07-19 15:19:16
|
a）293ET细胞共转染质粒后培养24h，弃掉培养基，PBS洗3遍，用1mL组织裂解缓冲液(PMSF+cocktail)裂解，冰上30min－2h，4℃，12000g离心20min，收集上清液。 b) 预留50μl做input，其余样品加入20μl的proteinG beads预沉淀以除去非特异性吸附的影响，4℃离心2500rpm，3min上清移入新EP管中，平均分为两份，一份加入4微升目的蛋白抗体，一份加入对应的IgG做为对照，4℃摇过夜。 d）加入40μl的proteinG beads，继续摇3h，离心去掉上清。用冷裂解液洗5次，每次2500rpm离心弃上清。 e) 将剩余的裂解液尽量洗干净，加入2×蛋白上样缓冲液，煮沸5min，离心 准备上样。 裂解液 10mM EDTA 10mM EGTA 25mM Tris 1% NP40 |
2楼2012-07-19 14:00:27
3楼2012-07-20 12:28:58
4楼2012-07-20 15:23:13