| 查看: 560 | 回复: 3 | |||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | |||
linatracy金虫 (小有名气)
|
[求助]
Elisa
|
||
|
我正在测我免小鼠的血清抗体水平，可是呢，我做了一个对照就是不加一抗的，读出的值很大，这是为什么？ 求高手解释！谢谢 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 【分子生物】EPI帖 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
linatracy» 猜你喜欢
PROTAC药物开发选择VHL配体：MDK-7526以87%出口向量占有率成首选
已经有0人回复
-
MCC950：NLRP3炎症小体特异性抑制剂的科研应用与前景
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有66人回复
-
康替唑胺研发17年：如何解决多重耐药菌感染难题
已经有0人回复
-
伊曲莫德（Etrasimod）从“肠道免疫失控”到精准靶向干预
已经有1人回复
-
西达本胺：创新HDAC抑制剂的抗肿瘤之路
已经有0人回复
-
金色抗生素单硫酸卡那霉素的物化性质、制备与前景
已经有0人回复
-
解密度鲁特韦——新一代HIV整合酶抑制剂的化学、药理与产业化图景
已经有0人回复
-
左炔诺孕酮从沃氏氧化物到炔基化反应的工艺迭代与靶点解析
已经有0人回复
-
“关闭瘙痒信号”的多肽地非法林醋酸盐全解析
已经有1人回复
tupac225
金虫 (正式写手)
- MolEPI: 5
- 应助: 103 (高中生)
- 金币: 1967.9
- 散金: 20
- 红花: 4
- 帖子: 460
- 在线: 175.3小时
- 虫号: 1533370
- 注册: 2011-12-11
- 性别: GG
- 专业: 免疫生物学
【答案】应助回帖
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, MolEPI+1, 怎么这么好的帖子，我现在才看见，奇怪中 2012-09-07 13:37:50
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, MolEPI+1, 怎么这么好的帖子，我现在才看见，奇怪中 2012-09-07 13:37:50
|
我觉得你的问题很常见，一般造成假阳性值高，也就是高背景的原因有如下几个: 1.孵育的时间过长和温度过高 2.不恰当的洗涤 3.试剂污染 4.孵育时酶标板被污染 5.盖板、容器或者枪头被污染 6.商家检测时酶标板底部有指纹或者其他痕迹 7.封闭液 针对您的问题 您可以逐一排查问题 1.只加二抗的孔您确认只加了二抗，且添加在这个孔的其他试剂不会带来污染 2.只加二抗的孔您确认洗涤足够充分而不过量，以及合适的二抗孵育的时间和问题 3.只加二抗的孔您确认检测的时候正确设置了检测波长和校正波长，或者正确设置了检测波长以及有空白对照 4.上机检测前用无残留擦镜纸轻轻擦拭板底 5.如以上都排除了，则考虑正是封闭液的问题，一般用BSA就可以的，如果不行，可以改用二抗来源的血清封闭如二抗是山羊抗小鼠的就用山羊封闭血清来封闭，浓度可以从1-3%都可以。 试着从这些方面找找原因，祝你实验成功。  |
2楼2012-07-18 22:33:04
linatracy
金虫 (小有名气)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 656.2
- 帖子: 91
- 在线: 70.3小时
- 虫号: 1359036
- 注册: 2011-08-02
- 性别: MM
- 专业: 兽医免疫学
3楼2012-07-18 22:51:36
loop00
木虫 (小有名气)
阿凡达
- 应助: 18 (小学生)
- 金币: 1553.3
- 散金: 15
- 红花: 2
- 帖子: 299
- 在线: 109.9小时
- 虫号: 466614
- 注册: 2007-11-24
- 性别: GG
- 专业: 生物信息学
4楼2012-09-07 06:36:08