| 查看: 650 | 回复: 3 | ||||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | ||||
linatracy金虫 (小有名气)
|
[求助]
Elisa
|
|||
|
我正在测我免小鼠的血清抗体水平，可是呢，我做了一个对照就是不加一抗的，读出的值很大，这是为什么？ 求高手解释！谢谢 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 【分子生物】EPI帖 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
linatracy» 猜你喜欢
PRMT5·MTA 抑制剂 MRTX1719 的科研应用
已经有0人回复
-
SW033291 科研使用解析：分子特征、储存与实验获取要点
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有58人回复
-
泛 RAS 抑制新思路：大环肽拟似物如何同时牵住突变型与野生型 RAS？
已经有0人回复
-
TYK2/JAK1 双靶点工具化合物 Brepocitinib：激酶选择性、研究进展与实验应用全解析
已经有0人回复
-
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷质控实录：从一张HPLC图谱读懂纯度与稳定性
已经有0人回复
-
恩诺沙星（Enrofloxacin）科研解析：分子特征、LC-MS/MS 检测与实验室使用要点
已经有0人回复
-
Calderasib理化性质与实验操作技术笔记
已经有0人回复
-
RMC-6291怎么用？RAS(ON) 三重复合物工具化合物的实验室实操要点
已经有0人回复
-
苯并呋咱全解析：NBD 荧光衍生化试剂母核的化学特性与实验室应用
已经有0人回复
-
生物质炭与活化剂氢氧化钾混合注意事项
已经有0人回复
tupac225
金虫 (正式写手)
- MolEPI: 5
- 应助: 103 (高中生)
- 金币: 1967.9
- 散金: 20
- 红花: 4
- 帖子: 460
- 在线: 175.4小时
- 虫号: 1533370
- 注册: 2011-12-11
- 性别: GG
- 专业: 免疫生物学
【答案】应助回帖
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, MolEPI+1, 怎么这么好的帖子，我现在才看见，奇怪中 2012-09-07 13:37:50
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, MolEPI+1, 怎么这么好的帖子，我现在才看见，奇怪中 2012-09-07 13:37:50
|
我觉得你的问题很常见，一般造成假阳性值高，也就是高背景的原因有如下几个: 1.孵育的时间过长和温度过高 2.不恰当的洗涤 3.试剂污染 4.孵育时酶标板被污染 5.盖板、容器或者枪头被污染 6.商家检测时酶标板底部有指纹或者其他痕迹 7.封闭液 针对您的问题 您可以逐一排查问题 1.只加二抗的孔您确认只加了二抗，且添加在这个孔的其他试剂不会带来污染 2.只加二抗的孔您确认洗涤足够充分而不过量，以及合适的二抗孵育的时间和问题 3.只加二抗的孔您确认检测的时候正确设置了检测波长和校正波长，或者正确设置了检测波长以及有空白对照 4.上机检测前用无残留擦镜纸轻轻擦拭板底 5.如以上都排除了，则考虑正是封闭液的问题，一般用BSA就可以的，如果不行，可以改用二抗来源的血清封闭如二抗是山羊抗小鼠的就用山羊封闭血清来封闭，浓度可以从1-3%都可以。 试着从这些方面找找原因，祝你实验成功。  |
2楼2012-07-18 22:33:04
linatracy
金虫 (小有名气)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 656.2
- 帖子: 91
- 在线: 70.3小时
- 虫号: 1359036
- 注册: 2011-08-02
- 性别: MM
- 专业: 兽医免疫学
3楼2012-07-18 22:51:36
loop00
木虫 (小有名气)
阿凡达
- 应助: 18 (小学生)
- 金币: 1553.3
- 散金: 15
- 红花: 2
- 帖子: 299
- 在线: 109.9小时
- 虫号: 466614
- 注册: 2007-11-24
- 性别: GG
- 专业: 生物信息学
4楼2012-09-07 06:36:08
