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小虫子666

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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小丹木木: 金币+3, MolEPI+1, 鼓励热心的虫虫,积极交流经验 2012-07-18 13:53:40
12泳道也不是完全降解,降解的话应该弥散的带,你这个还能看到2条主带,3 4泳道,我认为完全可以做反转录,做PCR。
下面是我用trizol提植物RNA的一些建议:
用trizol提的时候,加入trizol后充分裂解,离心裂解破碎的细胞杂质, 吸上清后,再加氯仿抽取,再加异丙醇沉淀。如果认为杂质还是很多,可以重复用氯仿抽取数次,然后再沉淀。最后一次氯仿抽提,吸上清切记不用洗到中间层。沉淀RNA,离心后,若不见胶状沉淀,也不要认为RNA没有,用30微升DEPC水反复吹打并冲洗管壁。   
是提植物RNA吗? 研磨的样品可以多点,1.5ml管我一般是装到0.3-0.5ml 加1ml trizol  我做的是大豆 根茎叶 种子用trizol 都有不错的结果 。 根 茎 trizol 最好提了。 物种不同方法也不同用的RNA试剂也不同,棉花高酚的用trizol 就不行。自己再多试试吧。
7楼2012-07-17 11:02:59
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