| 查看: 3142 | 回复: 19 | |||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[求助]
请帮忙分析一下提取RNA遇到的问题
|
|||
|
我实验室的Trizol提取RNA，氯仿分层以后，提取上清液，加入异丙醇时，出现大量浑浊悬浮白色沉淀，而且离心后发现管底有一大坨白色物质，量很大，应该不是RNA那种透明的胶状沉淀。这个沉淀很难溶解，我加了500微升的水才完全溶解。 我以前提的效果很好，不知道这几次到底是什么原因？请帮忙分析一下！ 另外，我又买promega试剂盒Z3100，提取RNA，效果也不是很好，我的下游主要是做PCR。 我以前提的效果很好，不知道这几次到底是什么原因？请帮忙分析一下！ 电泳图见附件，第2，3泳道是用Trizol提的，4，5泳道是用试剂盒提的！ 如果做PCR的话，后两个泳道的RNA可以用吗？可以直接进行一步法PCR吗？ 谢谢！  |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有273人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
328533973
金虫 (正式写手)
- 应助: 60 (初中生)
- 金币: 1052.4
- 帖子: 811
- 在线: 60.2小时
- 虫号: 1068814
- 注册: 2010-08-03
- 性别: GG
- 专业: 药剂学
【答案】应助回帖
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励应 2012-07-19 15:11:49
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励应 2012-07-19 15:11:49
| 第2,3泳道的RNA降解得比较严重，是否是使用器材未RNA酶抑制剂处理好？第4泳道RNA的量比较多，如果为目的片段，可用于后续的PCR，第5泳道的回收后注意用量也可以做后续的PCR。当提取RNA比较纯是一般可以用一步法。关于“提取上清液，加入异丙醇时，出现大量浑浊悬浮白色沉淀，而且离心后发现管底有一大坨白色物质，量很大，应该不是RNA那种透明的胶状沉淀。这个沉淀很难溶解，我加了500微升的水才完全溶解。”的问题，本人认为可能是加入异丙醇后晃动较为剧烈的原因，仅供参考。 |
13楼2012-07-18 19:37:20
shenye.judy
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 25 (小学生)
- 金币: 2350.7
- 红花: 1
- 帖子: 501
- 在线: 53.7小时
- 虫号: 310766
- 注册: 2006-12-24
- 性别: MM
- 专业: 植物遗传学
2楼2012-07-16 19:39:51
3楼2012-07-16 19:56:31
4楼2012-07-16 20:03:57