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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 无模板pcr合成短片段 一直失败
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wy135033405

木虫 (小有名气)
引用回帖:
39楼: Originally posted by 547star at 2012-07-19 22:07:09
得了50分，是第2次得这么多金币，最多的一次是今年注册7周年领的金币。不说点，似乎对不住楼主。
通常基因合成的方法有OE-PCR,连接酶PCR(LCR)和TBIO,其他都是这些方法的变种。有时间可以看看高朝辉博士论文<< ...

谢谢前辈，这篇帖子读下来受益良多，您和之前一位五位数前辈的讲解都让我受到很大启发。金币什么的都是次要，难得有诸位领路，让我少走了很多弯路。这么看不如早点发这个求助帖了哈哈，再次感谢。
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41楼2012-07-19 22:25:42
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wy135033405

木虫 (小有名气)
引用回帖:
38楼: Originally posted by nmhsd at 2012-07-19 21:55:32
我只是想知道怎么能做出来。绝无其他意思。...

淡定，我是在开玩笑~
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42楼2012-07-19 22:26:17
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547star

木虫 (著名写手)
http://www.jcvi.org/cms/about/bios/dgibson/
http://www.pnas.org/content/105/51/20404.full.pdf+html
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为什么
43楼2012-07-19 22:26:39
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sunny_andy

金虫 (小有名气)
送红花一朵
我现在也在做短片段融合 我连基本体系都不清楚  只做过普通PCR 想请教具体的PCR体系和您做短片段融合的经验  我有差不多20个短片段 老师还催得特别紧没有时间给我摸索浪费  可以传授下经验吗  特别着急！
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44楼2014-08-11 19:22:38
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小马步步高

金虫 (初入文坛)
送红花一朵
能请教一下楼主最后怎么做出来的吗？小弟我现在也遇到了同样的问题，pcr都做了两个多星期了，TBIO、TBC以及重组的方法都试过了，退火和延伸的温度、时间也都试了好多，目前只能连上P2-P5这四段，P1和P6怎么都连不上，还望前辈指点迷津，小弟将不胜感激
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45楼2016-03-08 21:42:59
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