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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 微米和纳米 » 学术交流 » 直接把有荧光的量子点溶液和金纳米溶液混合在一块的话，会发生淬灭吗？
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maxingyi

木虫 (正式写手)

小马求学
引用回帖:
10楼: Originally posted by 不需理由 at 2012-07-14 11:20:27
如果量子点（供体）的发射光谱和纳米颗粒（受体）的吸收光谱重合有重叠，当两者距离（范围在3nm-8nm）之间，会发生FRET。量子点发射的光通过能量转移到纳米颗粒，纳米颗粒被激发后发射光子。能量传递的效率E=1/(1+( ...

谢谢。请问，当两者距离达到FRET的范围，供体的浓度又很高的时候，供体受到激发后，发射光谱会同时呈现受体和供体的波段吗？这个时候是不是就像文献里面，检测供体PL的减少量了？
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千里马常有
11楼2012-07-16 10:47:54
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不需理由

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
maxingyi: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢！ 2012-07-16 17:35:49
引用回帖:
11楼: Originally posted by maxingyi at 2012-07-16 10:47:54
谢谢。请问，当两者距离达到FRET的范围，供体的浓度又很高的时候，供体受到激发后，发射光谱会同时呈现受体和供体的波段吗？这个时候是不是就像文献里面，检测供体PL的减少量了？...

以楼主的问题看来，我觉得需要解释FRET两种不同的情况：
1. 研究目标为单个供体和单个受体之间的作用。如果两者距离达到FRET，供体受到激发后能量传给受体，发出的光只是在受体的发射波段。举个例子，在FRET需要的距离（几个nm），是远远小于衍射极限的，放大倍率再大的显微镜也不可能直接看到两者的分界。所以需要用光学的方法分辨到底有没有单个供体和受体同时存在。如果供体的吸收和发射分别在532nm和640nm，受体的吸收和发射分别在640nm和670nm。那么，如果我用532nm的激光激发，看到670nm的光，很明显证明供体和受体发生了FRET。一个辅助的证明是，如果我用640nm的光直接激发这个区域，探测到670nm的光，证明受体是存在的。
2. 研究目标为大量供体和受体同时高浓度混合。这时候呈现的是大量分子的系综效应。如果用532nm的光激发，在探测的发射光谱肯定会同时存在640nm和670nm，因为不能保证所有供体受到激发后都会有合适的受体发生FRET。在系综中探测光谱是看不到供体是否发生FRET的，只有依靠探测荧光计数的变化。简单的说，有100个供体和100个受体混合，其中有10对满足FRET的距离。那么如果用532nm的光激发，探测640nm的荧光光子计数，供体PL会有一个1/10的减少量。另外我们也可以直接探测670nm的荧光光子计数，在背景基础上有10对FRET的贡献。

研究领域不同，我也不敢妄下结论，只是个人的见解而已。不知道楼主是研究单个的还是系综的？前面有人说的"Considering the inner filter effect, the PL of QDs may also  decrease if the concentration of AuNPs is too high, even there is no FRET." 其中的inner filter effect我没有具体考察过，楼主可以考虑一下这是什么状况。
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12楼2012-07-16 11:27:00
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maxingyi

木虫 (正式写手)

小马求学
引用回帖:
12楼: Originally posted by 不需理由 at 2012-07-16 12:27:00
以楼主的问题看来，我觉得需要解释FRET两种不同的情况：
1. 研究目标为单个供体和单个受体之间的作用。如果两者距离达到FRET，供体受到激发后能量传给受体，发出的光只是在受体的发射波段。举个例子，在FRET需要的 ...

谢谢您的回复。看来我要研究的情况属于系综。在满足FRET条件的前提下，要看有多少受体跟供体通过适当的连接物（比如DNA）连接在了一起，该选择哪个波长激发，检测哪个波长下荧光的变化？（1）用531 nm的光激发，检测640 nm荧光强度的减少量？（2）用用531 nm的光激发，检测670 nm荧光强度的增加量？或者其他选择？
再次感谢！
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千里马常有
13楼2012-07-16 17:49:20
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niceheart

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

可以负责任的告诉你，会发生淬灭。
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14楼2012-07-16 20:21:16
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不需理由

木虫 (著名写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by maxingyi at 2012-07-16 17:49:20
谢谢您的回复。看来我要研究的情况属于系综。在满足FRET条件的前提下，要看有多少受体跟供体通过适当的连接物（比如DNA）连接在了一起，该选择哪个波长激发，检测哪个波长下荧光的变化？（1）用531 nm的光激发，检 ...

我个人的观点，用532nm光激发，看670nm区域的荧光强度比较合适。供体发光在640nm，如果选择这个区域的滤光片，看它的荧光强度的减少量，背景肯定会大一些。如果选择合适的滤光片，直接看受体发光670nm的荧光，那么就是在原来的零背景下看一个增加量。简单的说，在暗的背景下看一个光源的打开总比在亮的背景下看一个光源的熄灭要容易一些吧。
其实这两个波段是不冲突的，可以用滤光片把640nm和670nm光分开，同时成像，这样对比更明显。比如两张照片，一张看供体发光640，在发生FRET的区域是暗的，其他区域是亮的。另一张看受体发光670，在发生FRET区域是亮的，其他区域是暗的。两张照片一对比，什么地方发生FRET一目了然。
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15楼2012-07-16 23:11:50
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maxingyi

木虫 (正式写手)

小马求学
谢谢，欢迎多交流！
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千里马常有
16楼2012-07-21 17:21:36
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maxingyi

木虫 (正式写手)

小马求学
老师的回答让人学到了很多，欢迎同行在此多交流互动
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千里马常有
17楼2012-10-04 20:57:43
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ypgou123

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

您好，我是刚接触量子点这方面，但是你说的那种情况是可以发生猝灭的，我做过，但是究其猝灭机制，就不清楚了，望高手指教~
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思考力乃万力之源，行动力乃万力之本，表达力乃万力之魂，从绝望中寻找希望，人生终将辉煌！
18楼2013-03-25 22:58:40
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huterx

金虫 (小有名气)
???? лл
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19楼2013-11-24 17:23:42
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河水流云

木虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 不需理由 at 2012-07-14 10:20:27
如果量子点（供体）的发射光谱和纳米颗粒（受体）的吸收光谱重合有重叠，当两者距离（范围在3nm-8nm）之间，会发生FRET。量子点发射的光通过能量转移到纳米颗粒，纳米颗粒被激发后发射光子。能量传递的效率E=1/(1+( ...

你好，我现在遇到一个问题就是，我用氧化石墨烯作为猝灭剂来猝灭纳米荧光材料的荧光，一般文章里面用氧化石墨烯做猝灭剂都是FRET机理，但是我在纳米荧光材料外面包裹了一层十多纳米的氧化硅，这样就不满足FRET的距离要求了，但同样也能猝灭荧光，请问这是什么原理呢
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20楼2013-12-16 15:59:33
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