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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 表皮细胞传代问题
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flytime1115

铜虫 (初入文坛)

[求助] 表皮细胞传代问题

请问有木有人培养过动物皮肤表皮细胞？怎么传代效果会好一些？我用胰酶消化法传的代，可是细胞死了好多……样品很珍贵，求指点~~
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1楼 2012-07-11 11:25:56
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angie8610

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我做的事表皮细胞中黑素细胞的培养，用胰酶消化1min做传代，但每次传代后都不再生长，也在寻找原因，细胞原代培养真是麻烦呀，做了快一年了依旧没有进展，祝福lz也祝福自己早日成功！
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新手上路，多多关照！
4楼2012-07-12 09:26:00
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zwzlysh

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yqbter: 金币+2, 鼓励发帖！ 2012-07-12 08:23:27
我养过人的皮肤上角质细胞，用胰酶消化后传代，不会出现细胞死亡的现象啊，你的细胞是不是状态不好啊？
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2楼2012-07-11 17:21:05
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flytime1115

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zwzlysh at 2012-07-11 17:21:05
我养过人的皮肤上角质细胞，用胰酶消化后传代，不会出现细胞死亡的现象啊，你的细胞是不是状态不好啊？

我是原代。细胞消化下来就很费劲。你胰酶消化多久啊……
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3楼2012-07-11 21:31:18
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rb

木虫 (著名写手)

小笨虫虫

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
胰酶消化根据具体培养状况看，消化时间不等，还是需要通过倒置显微镜来观察的，一般1-5分钟不等的，甚至有时候要放到37度培箱中的；同时你培养基用的是什么？
我知道有些人用这个培基：
F12和DMEM按3∶1 的比例混合,加入10 ng/ ml 表皮生长因子,0. 4 μg/ ml 氢化可的松, 20 %胎牛血清, 100u/ ml青霉素,100 u/ ml 链霉素,0. 4 mg/ ml 谷氨酰胺及0. 5μg/ ml异丙肾。
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寝室楼的大爷、大妈都是哲学家，他们每天都在思考人类最根本的三个问题：你是谁？你从哪儿来？要去哪儿？
5楼2012-07-12 10:42:16
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