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汕头大学海洋科学接受调剂
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flytime1115

铜虫 (初入文坛)

[求助] 表皮细胞传代问题

请问有木有人培养过动物皮肤表皮细胞?怎么传代效果会好一些?我用胰酶消化法传的代,可是细胞死了好多……样品很珍贵,求指点~~
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flytime1115

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zwzlysh at 2012-07-11 17:21:05
我养过人的皮肤上角质细胞,用胰酶消化后传代,不会出现细胞死亡的现象啊,你的细胞是不是状态不好啊?

我是原代。细胞消化下来就很费劲。你胰酶消化多久啊……
3楼2012-07-11 21:31:18
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查看全部 11 个回答

zwzlysh

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yqbter: 金币+2, 鼓励发帖! 2012-07-12 08:23:27
我养过人的皮肤上角质细胞,用胰酶消化后传代,不会出现细胞死亡的现象啊,你的细胞是不是状态不好啊?
2楼2012-07-11 17:21:05
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angie8610

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我做的事表皮细胞中黑素细胞的培养,用胰酶消化1min做传代,但每次传代后都不再生长,也在寻找原因,细胞原代培养真是麻烦呀,做了快一年了依旧没有进展,祝福lz也祝福自己早日成功!
新手上路,多多关照!
4楼2012-07-12 09:26:00
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rb

木虫 (著名写手)

小笨虫虫

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
胰酶消化根据具体培养状况看,消化时间不等,还是需要通过倒置显微镜来观察的,一般1-5分钟不等的,甚至有时候要放到37度培箱中的;同时你培养基用的是什么?
我知道有些人用这个培基:
F12和DMEM按3∶1 的比例混合,加入10 ng/ ml 表皮生长因子,0. 4 μg/ ml 氢化可的松, 20 %胎牛血清, 100u/ ml青霉素,100 u/ ml 链霉素,0. 4 mg/ ml 谷氨酰胺及0. 5μg/ ml异丙肾。
寝室楼的大爷、大妈都是哲学家,他们每天都在思考人类最根本的三个问题:你是谁?你从哪儿来?要去哪儿?
5楼2012-07-12 10:42:16
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