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greatwall201铜虫 (小有名气)
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求助亚硝酸还原酶测定方法
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5楼2012-09-18 21:02:37
greatwall201
铜虫 (小有名气)
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2楼2012-07-08 17:00:37
你做怎么样了，现在 3楼2012-07-09 16:45:00
greatwall201
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NiR 活性分析按照 Rao 等(1981)方法，由亚硝酸的用量决定。反应最终体积为 1.35mL，其中包括：1mL 100mM钾-磷酸缓冲液，pH 7.5，0.05 mL 10 mM 的KNO2，0.05 mL 甲基紫精（15mg/mL 的钾-磷酸缓冲液）；蒸馏水 0.05 mL；最后加酶提取物 0.15 mL。反应通过加 0.05 mL 连二亚硫酸钠盐启动(50 mg/mL)，在 25℃下反应 30 分钟后，至甲基紫精颜色消失，取 0.2mL 反应液用蒸馏水快速稀释到 6.7mL，加入用 3N HC1 配置的 10% (w/v)磺胺 1.8 mL和 1% (w/v)盐酸萘乙二胺 1.5mL。在加入这些二氮偶合试剂 15 分钟后，测定 540 nm 吸光率。亚硝酸的量通过亚硝酸标准曲线计算。 |
4楼2012-07-10 10:09:35
