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guangmingzhizi铁虫 (初入文坛)
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[交流]
关于Dig RNA 探针标记的问题 已有1人参与
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有做 Dig RNA labeling 的吗？roche 的kit. DIG RNA Labeling Kit (SP6/T7) RNA labeling with digoxigenin-UTP by in vitro transcription with SP6 and T7 RNA polymerase 说明书里： Sample Preparation • Linearize the DNA template by cutting at a restriction enzyme site downstream from the cloned insert. • To avoid transcription of undesirable sequences, use a restriction enzyme that creates 5´ overhangs. 对于内切酶的如何选择，这里强调是要5'突出，我无法理解，请大家给解答下好吗？不胜感激。 此外，标记的RNA探针，说明书里： The RNA transcripts can be analyzed by agarose gel electrophoresis (e.g., formaldehyde gels or native gels) and ethidium bromide staining. RNA，单链，在我的印象中是不能被EB很好的染色，但文献中，有图有真相。容不得我有丝毫怀疑，这一点，也请大家给解答下。再次感谢。 |
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2012-07-03 19:58:50, 216.39 K
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