| 查看: 1220 | 回复: 0 | ||
[求助]
关于提取液体样品DNA的问题
|
|
我是新人，在暑假提前到了实验室，然后老板送来一份液体麦精和玉米糖浆的样品，说让我提取一下DNA。我找了一下，发现实验室里没有现成的提取液体物质DNA方法，就先用CTAB法试试。 现在最主要的问题是在放入异丙醇沉淀时，离心后看不到沉淀，硬着头皮往下做结果基本都是提不到东西。请问这种情况应该怎么解决？是不是糖类物质造成了干扰？我把我的实验步骤贴上来，请大家帮我参考下，谢谢。 （1)取3g 液体样品装入 离心管中，加6ml TES、15μL Proteinase K，55℃孵育2h，每15min 涡旋混匀； （2)加2.3ml 5 M 的NaCl 溶液调节盐浓度至1.4 M，加100μL 10％ CTAB， 65℃水浴10 min；12,000rpm离心10min，取上清液至 离心管中。 （3)加入等体积氯仿：异戊醇（24:1），颠倒混匀，4 ℃，12,000rpm离心10min，取上清液至离心管中； （4)加入0.55倍体积的预冷异丙醇，-20 ℃放置30 min；4 ℃，12,000rpm离 心15min，弃异丙醇； （5）（70%乙醇洗2 次）第一次加700μL，轻轻涡旋混匀，4 ℃，12,000rpm离心5min，弃乙醇；第二次加200μL，弃乙醇，4 ℃，12,000rpm离心30秒，用枪头吸取离心管中残留的乙醇； （6）室温晾干，15-30分钟，至无乙醇味。 （7）加100μL ddH2O熔解，-20 ℃冻存待用。 |
回复此楼» 猜你喜欢
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析
已经有0人回复
-
AM630（CAS 164178-33-0）：CB2 选择性配体的实验使用与供应要点
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有95人回复
-
ADC标杆分子T-DM1全解析：从结构设计到实验室应用的技术要点
已经有0人回复
-
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？
已经有0人回复
-
His标签蛋白纯化怎么才能快？
已经有0人回复
-
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析
已经有0人回复
-
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用
已经有0人回复
-
SHP2 变构抑制剂 Sitneprotafib：从作用机制到科研试剂选型要点
已经有0人回复
-
PRMT5·MTA 抑制剂 MRTX1719 的科研应用
已经有0人回复
-
SW033291 科研使用解析：分子特征、储存与实验获取要点
已经有0人回复
找到一些相关的精华帖子，希望有用哦~
在用液氮研磨样品提取DNA时，最需要注意什么问题？
已经有5人回复
- 有关提取全血DNA和RNA问题。
已经有4人回复
- 基因组DNA提取问题
已经有32人回复
- 基因组文库-----genomic library
已经有11人回复
- 噬菌体DNA提取问题
已经有4人回复
- 关于DNA提取的问题
已经有9人回复
- 【原创】原创之六：环境样品总DNA的提取与纯化【已搜索无重复】
已经有178人回复
- 【求助/交流】DNA提取问题
已经有25人回复
- 【求助/交流】PCR 的原理是啥啊
已经有20人回复
- 【求助/交流】请教大家关于dna提取的问题
已经有17人回复
- 【分享】DNA重组实验中的部分技术
已经有159人回复
点击这里搜索更多相关资源科研从小木虫开始，人人为我，我为人人