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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 关于HPLC的样品 纯化问题
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Keydream

木虫 (正式写手)

[求助] 关于HPLC的样品 纯化问题

我用美国waters 公司产的RP-HPLC
摸条件都用到了 水比甲醇 99：1了
纯化一个样品  
结果：出来的lc 图 之分出3个峰  但前面的那一堆峰 还是堆在一起分不开
求解释！
另外有没有简单可行的办法使前面那堆峰也分纯。
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1楼 2012-07-02 09:46:20
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zhongqq

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
豆哥: 金币+1, 谢谢参与交流 2012-07-02 14:22:05
Keydream: 金币+8, ★★★很有帮助 2012-07-03 23:54:41
你做的是植物成分还是其他啊？要是植物的话，前面那堆峰的出现是很正常的，不用恐慌，这也跟你上液相前的样品纯化有关，不过我一般不要这堆峰，关于3个峰，你可以先进2针样，分别接出来那3个峰，用薄层检测，看哪个是你要的峰，再针对那个峰摸条件
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2楼2012-07-02 10:46:28
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pal2004

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
leecius: 金币+1, 谢谢！ 2012-07-03 07:22:29
Keydream: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-07-03 23:55:02
极性这么大的话，换C8柱试试。
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3楼2012-07-02 16:01:30
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Keydream

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhongqq at 2012-07-02 10:46:28
你做的是植物成分还是其他啊？要是植物的话，前面那堆峰的出现是很正常的，不用恐慌，这也跟你上液相前的样品纯化有关，不过我一般不要这堆峰，关于3个峰，你可以先进2针样，分别接出来那3个峰，用薄层检测，看哪个 ...

我做的是植物成分。
有没什么办法 可以把那些挤在一起的峰分开呢？
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4楼2012-07-02 23:47:03
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小小笨笨虎

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
leecius: 金币+1, 谢谢交流！ 2012-07-03 07:22:49
Keydream: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-07-03 23:54:30
前面的一堆可以先接在一起，后面三个峰可以好好分析，如果还有很多样品要做的话，可以考虑暂时不分那一堆，如果实在想要，试着反复硅胶、ODS等方法分一分，积累经验，分不开的话，不要纠结，很正常。祝你成功。
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5楼2012-07-03 06:27:23
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yugijiang

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Keydream: 金币+4, ★有帮助 2012-07-03 23:55:38
应该是你流动相的洗脱和分离能力不好，可以调节下有机相种类，缓冲盐溶液什么的
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6楼2012-07-03 08:35:05
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~kane~

银虫 (正式写手)
不一定要液相啊，凝胶聚酰胺这些也可以试试啊，实在拿不到就算了吧，也不可能把一个植物里的成分拿到完啊，而且水层的东西本来就很杂，有很多是拿不到的
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？？？
7楼2012-07-03 22:15:23
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Keydream

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by ~kane~ at 2012-07-03 22:15:23
不一定要液相啊，凝胶聚酰胺这些也可以试试啊，实在拿不到就算了吧，也不可能把一个植物里的成分拿到完啊，而且水层的东西本来就很杂，有很多是拿不到的

嗯  就是这样的
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8楼2012-07-03 23:53:58
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zhongqq

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Keydream at 2012-07-02 23:47:03
我做的是植物成分。
有没什么办法 可以把那些挤在一起的峰分开呢？...

这个要看缘分啊，首先你可以试试把流动相的极性调大，让峰的分离度变大，但是有一个问题，流动相极性变大之后，峰会越来越矮胖，这也会影响出峰的，所以要看你的运气啦，看看能不能通过调节流动相，调小流速来分开着几个峰了。
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9楼2012-11-01 08:25:53
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