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shipolande

新虫 (初入文坛)

[求助] 土壤微生物16s rDNA 18s rDNA 抑制扩增不出来??????

土壤微生物16s rDNA 18s rDNA 一直扩增不出来,微生物总DNA是用试剂盒提取的,图示为土壤提取的DNA模板,可是一直就是P不出来,不知道是什么原因,自己稀释了10倍,50倍,100倍,只有50倍 的稍微有一点条带,但是很不明显,不知道什么原因,请大侠们指点指点 ,小弟不胜感激···········
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shipolande
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努力的小样

银虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 0609michael at 2012-09-18 09:26:57
請問是PCR總量體積添加百分之一的BSA就好了嗎?
你通常都怎麼做?
也有的人會使用DMSO或Tween,那添加的比例是怎麼樣呢? 謝謝...

你们好,不知道楼主P出来了没有?我也遇到了这个问题,提取DNA是褐色的,16s rDNA 18s rDNA 也是一直扩增不出来,微生物总DNA也是用试剂盒提取的,上海生工的土壤基因组 DNA快速抽提试剂盒提取的。希望你们给下指导,不胜感激!
虚心学习
13楼2013-05-13 01:52:40
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maomao1426

木虫 (著名写手)

可能是土壤里腐殖质太多,需要除掉的。
2楼2012-07-02 08:45:37
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zqk0532

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
因为细菌的GC含量通常比较高,所以建议使用GC buffer P
3楼2012-07-02 10:10:51
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swaucq

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
总DNA切胶回收纯化过吗?
不卑不亢
4楼2012-07-02 22:02:40
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