24小时热门版块排行榜    

查看: 1735  |  回复: 16

foxcl

铁虫 (正式写手)

[交流] 大家做JM109/110的电转参数多少? 已有5人参与

今天刚做2500v,25uF,200欧姆,2mm,不知道是电击杯的问题还是别的问题,直接爆火花了。 BIO-RAD仪器直接warning了,没有像往常一样显示结果。

大家说说有可能是什么原因吧

PS:1、电击杯擦干了
2、前天做GS115电转没有爆火花 1500v,25uF,200欧姆,2mm
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fenghan06

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
盐分太高了, 菌体多洗一次... DNA在纯化时候也多洗一次
2楼2012-06-28 23:45:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

microblue

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
另一种解决方法是减少所加质粒的量,就不会爆了。
3楼2012-06-29 01:31:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fenghan06

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
是啊, 其实细菌也不用太多, 我现在不管做基因重组还是普通质粒, OD600 0.7的culture里面抽800uL用1毫升10%glycerol洗两次就好了...
4楼2012-06-29 07:07:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ygyly

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
离子浓度高了吧,用核酸共沉剂处理一下再电转

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

5楼2012-06-29 10:40:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

沙中清泉

木虫 (正式写手)

盐浓度太高!
6楼2012-06-29 14:48:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

foxcl

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by fenghan06 at 2012-06-28 23:45:48
盐分太高了, 菌体多洗一次... DNA在纯化时候也多洗一次

直接连接产物电转的, 测了下连接产物浓度,大概150ng/ul,高的不可思议,测3次了都是这个范围左右。
7楼2012-06-30 13:43:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

foxcl

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by microblue at 2012-06-29 01:31:06
另一种解决方法是减少所加质粒的量,就不会爆了。

可能是,3次测了质粒浓度,大概150ng/ul,直接电转了8ul
8楼2012-06-30 13:44:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

foxcl

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 沙中清泉 at 2012-06-29 14:48:41
盐浓度太高!

JM110是甘油冻存的,你指的是连接产物的盐浓度太高了吧?
9楼2012-06-30 13:45:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

foxcl

铁虫 (正式写手)

送鲜花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by ygyly at 2012-06-29 10:40:22
离子浓度高了吧,用核酸共沉剂处理一下再电转

核酸共沉剂?
这个没做过,能不能指点下?用哪些试剂或试剂盒,谢谢中。
10楼2012-06-30 13:46:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 foxcl 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 5/250 2026-08-15 18:22 by 7huP8NPKZCp9
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 6/300 2026-08-15 18:18 by 7huP8NPKZCp9
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 5/250 2026-08-15 18:10 by 7huP8NPKZCp9
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 6/300 2026-08-15 18:06 by 7huP8NPKZCp9
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 7lpolszZVXgi 2026-08-14 7/350 2026-08-15 17:58 by 7huP8NPKZCp9
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +11 archvillain 2026-08-15 20/1000 2026-08-15 17:47 by 医学老男孩
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +27 医学老男孩 2026-08-13 58/2900 2026-08-15 15:57 by GZUZM
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 7lpolszZVXgi 2026-08-14 3/150 2026-08-15 14:53 by QXtWNz7PI7wZ
[博后之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 3/150 2026-08-15 12:41 by KxMI1BYBxWX1
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 5/250 2026-08-15 04:45 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
信息提示
请填处理意见