大家做JM109/110的电转参数多少？ - 微生物 - 实验/技术 - 第2页小木虫论坛-学术科研互动平台

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foxcl

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4楼: Originally posted by fenghan06 at 2012-06-29 07:07:55
是啊，其实细菌也不用太多，我现在不管做基因重组还是普通质粒， OD600 0.7的culture里面抽800uL用1毫升10%glycerol洗两次就好了...

呵呵，我是做完感受态直接甘油冻存的。下次试试你的这个方法。

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11楼2012-06-30 13:47:19

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沙中清泉

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9楼: Originally posted by foxcl at 2012-06-30 13:45:43
JM110是甘油冻存的，你指的是连接产物的盐浓度太高了吧？...

是的

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12楼2012-07-01 09:22:08

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flemingo

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★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

基本就是前几位说的问题，电击杯爆主要是里面的液体离子太多电阻不够。这个又分感受态和你加的DNA，感受态要是买的基本合格，要是自己做的一定要充分洗干净；点击的DNA最好用H2O洗脱，如果是溶在TE里的，加的量别太大。

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13楼2012-07-01 15:05:08

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foxcl

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13楼: Originally posted by flemingo at 2012-07-01 15:05:08
基本就是前几位说的问题，电击杯爆主要是里面的液体离子太多电阻不够。这个又分感受态和你加的DNA，感受态要是买的基本合格，要是自己做的一定要充分洗干净；点击的DNA最好用H2O洗脱，如果是溶在TE里的，加的量别太 ...

感受态自己做的，应该充分洗干净了。
可是如果链接产物中离子浓度高，该怎么处理？

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14楼2012-07-01 23:06:52

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