应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 大家做JM109/110的电转参数多少？
171/2返回列表12下一页
查看: 1752  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

foxcl

铁虫 (正式写手)

[交流] 大家做JM109/110的电转参数多少？ 已有5人参与

今天刚做2500v，25uF，200欧姆，2mm，不知道是电击杯的问题还是别的问题，直接爆火花了。 BIO-RAD仪器直接warning了，没有像往常一样显示结果。

大家说说有可能是什么原因吧

PS：1、电击杯擦干了
2、前天做GS115电转没有爆火花 1500v，25uF，200欧姆，2mm
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-06-28 23:10:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fenghan06

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
盐分太高了, 菌体多洗一次... DNA在纯化时候也多洗一次
赞一下 回复此楼
2楼2012-06-28 23:45:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

microblue

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
另一种解决方法是减少所加质粒的量，就不会爆了。
赞一下 回复此楼
3楼2012-06-29 01:31:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fenghan06

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
是啊， 其实细菌也不用太多， 我现在不管做基因重组还是普通质粒， OD600 0.7的culture里面抽800uL用1毫升10%glycerol洗两次就好了...
赞一下 回复此楼
4楼2012-06-29 07:07:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ygyly

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
离子浓度高了吧，用核酸共沉剂处理一下再电转
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

foxcl
5楼2012-06-29 10:40:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

沙中清泉

木虫 (正式写手)
盐浓度太高！
回复此楼
6楼2012-06-29 14:48:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

foxcl

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fenghan06 at 2012-06-28 23:45:48
盐分太高了, 菌体多洗一次... DNA在纯化时候也多洗一次

直接连接产物电转的， 测了下连接产物浓度，大概150ng/ul，高的不可思议，测3次了都是这个范围左右。
赞一下 回复此楼
7楼2012-06-30 13:43:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

foxcl

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by microblue at 2012-06-29 01:31:06
另一种解决方法是减少所加质粒的量，就不会爆了。

可能是，3次测了质粒浓度，大概150ng/ul，直接电转了8ul
赞一下 回复此楼
8楼2012-06-30 13:44:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

foxcl

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 沙中清泉 at 2012-06-29 14:48:41
盐浓度太高！

JM110是甘油冻存的，你指的是连接产物的盐浓度太高了吧？
赞一下 回复此楼
9楼2012-06-30 13:45:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

foxcl

铁虫 (正式写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by ygyly at 2012-06-29 10:40:22
离子浓度高了吧，用核酸共沉剂处理一下再电转

核酸共沉剂？
这个没做过，能不能指点下？用哪些试剂或试剂盒，谢谢中。
赞一下 回复此楼
10楼2012-06-30 13:46:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 foxcl 的主题更新
171/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +7 wangze12014 2026-08-14 8/400 2026-08-17 12:45 by a441914426
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +12 Ldrop2023 2026-08-13 13/650 2026-08-17 12:33 by gltch
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 i7NFEVbjQMM5 2026-08-16 4/200 2026-08-17 12:10 by 4GBAYCdVQoK3
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 6GojgJvkDudM 2026-08-16 4/200 2026-08-17 11:46 by 4GBAYCdVQoK3
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 6GojgJvkDudM 2026-08-16 3/150 2026-08-17 09:49 by xLVPIRuSvCUe
[论文投稿] 岩土工程学报什么时候才能终审完呐 25+3 yeager111 2026-08-10 4/200 2026-08-16 20:42 by tfang
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭