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大家做JM109/110的电转参数多少?
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foxcl
铁虫
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专业: 微生物生理与生物化学
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大家做JM109/110的电转参数多少?
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今天刚做2500v,25uF,200欧姆,2mm,不知道是电击杯的问题还是别的问题,直接爆火花了。 BIO-RAD仪器直接warning了,没有像往常一样显示结果。
大家说说有可能是什么原因吧
PS:1、电击杯擦干了
2、前天做GS115电转没有爆火花 1500v,25uF,200欧姆,2mm
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1楼
2012-06-28 23:10:09
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fenghan06
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是啊, 其实细菌也不用太多, 我现在不管做基因重组还是普通质粒, OD600 0.7的culture里面抽800uL用1毫升10%glycerol洗两次就好了...
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4楼
2012-06-29 07:07:55
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fenghan06
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盐分太高了, 菌体多洗一次... DNA在纯化时候也多洗一次
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2楼
2012-06-28 23:45:48
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microblue
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专业: 生物化学
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另一种解决方法是减少所加质粒的量,就不会爆了。
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3楼
2012-06-29 01:31:06
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ygyly
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虫号: 981790
注册: 2010-03-25
专业: 生物化学
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离子浓度高了吧,用核酸共沉剂处理一下再电转
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foxcl
5楼
2012-06-29 10:40:22
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