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lgs1

木虫 (小有名气)

[求助] 发酵产物HPLC结果分析

最近做的一批发酵貌似终于有了目的产物,但是HPLC的结果图不是很会看,跑了两次目的峰的出峰时间基本一致,下面就是我的HPLC图谱,上图是我的标准品,出峰时间为12.895min,下图是样品,出峰时间是12.909min,样品的峰很低,我不知道这个峰能不能算是特征峰,这个面积应该是从基线开始算还是从峰的尖角开始算,请大家指点,谢谢

标准品



样品
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caojing801

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
lgs1: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-07-01 14:40:19
1、你样品进液相时,应该是进了气泡,基线有很大的偏差,需要将基线走平后再进样。流动相需要30分钟超声除气,走基线时也要经常除气。
2、你样品进样前需要用三氯乙酸除蛋白。
3、标准品和样品进样时间不要间隔太久,温度对出峰时间有影响。
4、主峰出峰时间有少量的偏差是正常的。
9楼2012-06-29 17:01:38
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l68266152

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
lgs1: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-06-28 00:09:03
尖角开始算,看你这个图谱,建议你做下定量的萃取纯化再上HPLC,杂物质太多
相信自己
2楼2012-06-27 21:33:07
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lgs1

木虫 (小有名气)

不能证明有产物吗,我这个就是发酵液直接浓缩上的HPLC,杂质肯定很多,但是我跑了两次这个峰都出现了,我觉得可能性挺大的,要真不是的话就是空欢喜一场了
3楼2012-06-28 00:21:26
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ltx0744624

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
lgs1: 金币+1, 有帮助 2012-07-01 14:34:01
杂质太多了,时间都是指的峰顶的时间

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
解尔姆,朋至斯孚
4楼2012-06-28 07:30:06
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