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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 发酵产物HPLC结果分析
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lgs1

木虫 (小有名气)

[求助] 发酵产物HPLC结果分析

最近做的一批发酵貌似终于有了目的产物，但是HPLC的结果图不是很会看，跑了两次目的峰的出峰时间基本一致，下面就是我的HPLC图谱，上图是我的标准品，出峰时间为12.895min，下图是样品，出峰时间是12.909min，样品的峰很低，我不知道这个峰能不能算是特征峰，这个面积应该是从基线开始算还是从峰的尖角开始算，请大家指点，谢谢

标准品



样品
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1楼 2012-06-27 20:39:51
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caojing801

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
lgs1: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-07-01 14:40:19
1、你样品进液相时，应该是进了气泡，基线有很大的偏差，需要将基线走平后再进样。流动相需要30分钟超声除气，走基线时也要经常除气。
2、你样品进样前需要用三氯乙酸除蛋白。
3、标准品和样品进样时间不要间隔太久，温度对出峰时间有影响。
4、主峰出峰时间有少量的偏差是正常的。
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9楼2012-06-29 17:01:38
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l68266152

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
lgs1: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-06-28 00:09:03
尖角开始算，看你这个图谱，建议你做下定量的萃取纯化再上HPLC，杂物质太多
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相信自己
2楼2012-06-27 21:33:07
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lgs1

木虫 (小有名气)
不能证明有产物吗，我这个就是发酵液直接浓缩上的HPLC，杂质肯定很多，但是我跑了两次这个峰都出现了，我觉得可能性挺大的，要真不是的话就是空欢喜一场了
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3楼2012-06-28 00:21:26
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ltx0744624

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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lgs1: 金币+1, ★有帮助 2012-07-01 14:34:01
杂质太多了，时间都是指的峰顶的时间

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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解尔姆，朋至斯孚
4楼2012-06-28 07:30:06
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