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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 质量控制 » HPLC峰形
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huahua8572

木虫 (初入文坛)

[求助] HPLC峰形

最近在做一化合物的HPLC，出现了以下的现象，百思不得其解，望能有高手指点。
（1）化合物为盐酸盐，当流动相为水-0.1%甲酸-乙腈系统时，HPLC图谱中出现两个峰（图1），且两峰比例在刚配完样进样分析时约为15:85，之后一直稳定在25:75。为什么会出现两个色谱峰呢？

（2）同一化合物，当流动相为醋酸铵溶液（0.1%三乙胺，pH=6.2）-乙腈时，HPLC图谱如下（图2），出现一个鼓起来的峰，对应空白溶剂中没有该峰，这个鼓包该如何解释呢？可能是由什么引起的呢？

希望大家帮忙对以上两个现象进行分析讨论指点，万分感谢啊！！！

图2



图1
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1楼 2012-06-25 22:20:55
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liu2011

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

1.首先分析条件不是最佳！出峰太靠后
2.图1中前面那个鼓包，应该不是本次进样中峰，可能是上一针的残留
3.可以重复多次进样，如果每次都有，那么考虑加入缓冲液来改善峰形
4.图2中的前面的峰如果空白没有，那会不会样品中的某物质和流动相反应生成的新物质？、
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10楼2013-03-02 15:27:10
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ltxin2009

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
痴夷子皮: 金币+1, 谢谢交流，欢迎常来哦。 2012-06-27 08:20:04
1、试试用流动相溶解样品；
2、试试不同的波长；
3、试剂有时会影响。
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2楼2012-06-26 08:44:00
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snowrabbit

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
痴夷子皮: 金币+1, 谢谢交流，欢迎常来哦。 2012-06-27 08:20:11
样品纯吗？柱子平衡好了吗？该样品分析了几次？确定该数据重复吗？
图一中前面峰会不会是溶剂峰，如果不是溶剂峰，那保留时间也太短了。图二中包括鼓起来的峰，共三个峰。个人觉得色谱条件没稳定好。
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3楼2012-06-26 08:47:52
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xiaoxiazizx

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
痴夷子皮: 金币+1, 谢谢交流，欢迎常来哦。 2012-06-27 08:20:16
其中肯定有溶剂峰吧，你做的化合物不知道纯不纯，有可能有杂质吧
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刻意去找的东西，往往是找不到的。天下万物的来和去，都有他的时间。
4楼2012-06-26 08:56:49
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