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huahua8572

木虫 (初入文坛)

[求助] HPLC峰形

最近在做一化合物的HPLC,出现了以下的现象,百思不得其解,望能有高手指点。
(1)化合物为盐酸盐,当流动相为水-0.1%甲酸-乙腈系统时,HPLC图谱中出现两个峰(图1),且两峰比例在刚配完样进样分析时约为15:85,之后一直稳定在25:75。为什么会出现两个色谱峰呢?

(2)同一化合物,当流动相为醋酸铵溶液(0.1%三乙胺,pH=6.2)-乙腈时,HPLC图谱如下(图2),出现一个鼓起来的峰,对应空白溶剂中没有该峰,这个鼓包该如何解释呢?可能是由什么引起的呢?

希望大家帮忙对以上两个现象进行分析讨论指点,万分感谢啊!!!

图2



图1
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snowrabbit

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
痴夷子皮: 金币+1, 谢谢交流,欢迎常来哦。 2012-06-27 08:20:11
样品纯吗?柱子平衡好了吗?该样品分析了几次?确定该数据重复吗?
图一中前面峰会不会是溶剂峰,如果不是溶剂峰,那保留时间也太短了。图二中包括鼓起来的峰,共三个峰。个人觉得色谱条件没稳定好。
3楼2012-06-26 08:47:52
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ltxin2009

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
痴夷子皮: 金币+1, 谢谢交流,欢迎常来哦。 2012-06-27 08:20:04
1、试试用流动相溶解样品;
2、试试不同的波长;
3、试剂有时会影响。
2楼2012-06-26 08:44:00
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xiaoxiazizx

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
痴夷子皮: 金币+1, 谢谢交流,欢迎常来哦。 2012-06-27 08:20:16
其中肯定有溶剂峰吧,你做的化合物不知道纯不纯,有可能有杂质吧
刻意去找的东西,往往是找不到的。天下万物的来和去,都有他的时间。
4楼2012-06-26 08:56:49
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liu2011

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
痴夷子皮: 金币+1, 谢谢交流,欢迎常来哦。 2012-06-27 08:20:21
1.样品可能有杂质
2.样品放置或者配置过程中出现分解或氧化现象
3.用流动相溶解样品
4.考虑这个化合物有没有同分异构体,不过极性相差这么大,也不大可
   能是同分异构体的事情
5.化合物容易氧化,要在分析过程中尽量采用配置后马上分析的原则
5楼2012-06-26 09:17:13
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