应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 做GS115感受态最后一步－80保藏，是否需要加甘油？
52/1返回列表
查看: 3536  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

foxcl

铁虫 (正式写手)

[求助] 做GS115感受态最后一步－80保藏，是否需要加甘油？

按正常方法制做GS115酵母感觉态。

200mL最后加2mL的山梨醇，是否需要加50%甘油再－80度保藏？

因为做Jm109感受态的时候，最后一步我是加50ul的CaCl2和50ul的甘油（总共100ul），然后－80保藏。所以有此一问。

谢谢。
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2012-06-23 00:22:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qinxiaoling

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by molecula at 2012-06-23 11:24:25
我的建议是  把做好的感受态的EP管放在大的50ml离心管中
在50ml离心管中装入甘油
然后放入-80  这样的方法好处有两个
第一  缓慢降温，更有利于感受态的效率
第二  最大效率防治冰晶产生
即便是超低温停电除了 ...

那小EP管里不加甘油的话不会结冰么？
赞一下 回复此楼
13楼2013-11-18 10:23:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

灵响2010

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 端午节快乐，欢迎来微生物板块交流^_^ 2012-06-23 16:40:57
foxcl: 金币+1, 可是很多时候都是做大批量再冷冻的啊。 2012-06-23 16:51:18
毕赤酵母感受态细胞，是现做现用的
赞一下 回复此楼
2楼2012-06-23 09:51:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

青鸟7980

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 端午节快乐，欢迎来微生物板块交流^_^ 2012-06-23 16:41:03
foxcl: 金币+1, ★★★★★最佳答案, 对山梨醇特性不熟，所以最后还是加了一半的甘油。 2012-06-23 16:51:58
不加甘油
里面不是加了山梨醇吗
就这样放负80度冰箱里
可以用至少2个月
赞一下 回复此楼
3楼2012-06-23 10:09:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

molecula

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+2, 端午节快乐，欢迎来微生物板块交流^_^ 2012-06-23 16:41:12
foxcl: 金币+1, ★★★★★最佳答案, 想知道如果最后一步50ul的山梨醇+50ul的50%甘油，再冷冻是否可行？有什么影响？ 2012-06-23 16:53:07
我的建议是  把做好的感受态的EP管放在大的50ml离心管中
在50ml离心管中装入甘油
然后放入-80  这样的方法好处有两个
第一  缓慢降温，更有利于感受态的效率
第二  最大效率防治冰晶产生
即便是超低温停电除了故障
外围的甘油也有一个缓慢升温的过程
这个是实验室小技巧
呵呵~
赞一下(2人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

lvye3707
4楼2012-06-23 11:24:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭