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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 求助在HPLC上检测蛋白质的波长选择
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yfanzgc

新虫 (小有名气)

[求助] 求助在HPLC上检测蛋白质的波长选择

用HPLC做检测蛋白质时，我选用的是254nm的波长。但是看相关文献中使用的大多数都是214nm（所用的仪器是毛细管电色谱）。请问这个波长是怎么选定的呢？不做定量分析的情况下，我的这个254nm条件下的检测对结果的影响大吗？
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1楼 2012-06-20 01:16:06
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wjs雪娃0601

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 龙翔在天 at 2012-06-20 08:54:38
280nm啊
做蛋白分离提纯的都是这个波长！

但是蛋白里面可能有核酸残留，核酸在280nm也有吸收，这对于检测蛋白的结果会有影响，这个怎样去除核酸的影响呢
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5楼2018-07-19 11:11:46
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
yfanzgc: 金币+1, ★有帮助 2012-06-20 16:02:58
紫外全波长扫描，选择最大吸收波长或最佳波长（结合杂质吸收波长考虑。波长不同响应值大小不同。
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守候在风中的宁静。
2楼2012-06-20 08:31:46
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龙翔在天

木虫 (小有名气)
280nm啊
做蛋白分离提纯的都是这个波长！
赞一下(1人) 回复此楼
欲谋发展大计，必察天下大势—————一切皆有可能
3楼2012-06-20 08:54:38
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liu2011

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
yfanzgc: 金币+1, ★有帮助 2012-06-20 16:03:03
如果不定量分析的话，那用什么方法积分呢，如果是面积归一法的话，可能影响还是蛮大的，原则上都是选择检测物质的最佳吸收波长
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4楼2012-06-20 09:50:19
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