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哲浩

木虫 (正式写手)

[求助] 细胞实验问题

最近做了一个水凝胶的细胞实验,准备观察。我想问问如果材料本身是含水量高(大概500%),在SEM 的样品制备时,用戊二醛固定后还是用乙醇梯度脱水吗?有人说含水量高的梯度脱水会导致细胞的脱落?求高手解答
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pipibaby

专家顾问 (著名写手)

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★ ★ ★
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mwyuer: 金币+1, 感谢回帖交流 2012-06-20 08:04:52
哲浩: 金币+2 2012-06-20 19:43:56
你可以做平行的两组,一组是脱水的,时间短一些,另外一组是没有脱水的
然后在SEM下平行比较看看
一般情况下,脱水时间短的话,应该不会影响细胞的形态的,我做过
2楼2012-06-20 00:12:43
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哲浩

木虫 (正式写手)

3楼2012-06-20 00:13:05
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红舟流星

荣誉版主 (文坛精英)

志在成为千元户!

优秀版主优秀版主优秀版主

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哲浩: 金币+1 2012-06-20 19:43:10
尝试下冻干
也许对楼主有帮助
红楼一梦终难寻扁舟载酒且慢行落花流水依惜别月伴明星照前路
4楼2012-06-20 00:20:51
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mlanqiang

木虫之王 (文学泰斗)

蓝博士

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mwyuer: 金币+1, 感谢回帖交流 2012-06-20 08:05:27
哲浩: 金币+1 2012-06-20 19:43:17
用乙醇梯度脱水还好,对细胞影响不大。
蓝精灵
5楼2012-06-20 06:45:26
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duruo

荣誉版主 (文坛精英)

孩儿她爹

优秀超版优秀版主优秀区长

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mwyuer: 金币+1, 感谢回帖交流 2012-06-20 10:19:35
哲浩: 金币+2 2012-06-20 19:42:40
直接冻干不大可取,会破坏细胞形态
还是梯度脱水吧

不过最好选择在湿态下测量,比如荧光
能攻心则反侧自消,从古知兵非好战;不审势即宽严皆误,后来治蜀要深思
6楼2012-06-20 10:11:21
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茫然12388

木虫 (正式写手)

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mwyuer: 金币+1, 感谢回帖交流 2012-06-20 14:00:46
哲浩: 金币+2 2012-06-20 19:43:37
用乙醇梯度脱十分钟没有问题的,我试过
努力奋斗!
7楼2012-06-20 11:03:18
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哲浩

木虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 茫然12388 at 2012-06-20 11:03:18
用乙醇梯度脱十分钟没有问题的,我试过

就是在梯度脱水的时候从15min变成10min,其他都不改变吧
8楼2012-06-20 19:45:00
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zoujie

铁杆木虫 (职业作家)


mwyuer: 金币+1, 感谢回帖交流 2012-06-21 09:34:36
梯度脱水吧
这个靠谱!
9楼2012-06-21 09:24:26
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god1985

银虫 (小有名气)

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哲浩: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-06-24 00:09:24
mwyuer: 金币+1, 感谢回帖交流 2012-06-24 09:58:58
水凝胶没有必要做SEM啊,况且SEM也不能做含水的样品,要么你去做ESEM,但完全看不出细胞的形貌来,很少有文献作水凝胶用SEM观察的;
直接染色阿,live/dead,鬼笔环肽/DAPI都可以,如果你的水凝胶是透明的,用confocal能拍出十分漂亮的图片
10楼2012-06-23 23:24:32
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