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小雨莎莎木虫 (正式写手)
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[交流]
请教做VEGF促进细胞增殖的实验的相关事情 已有4人参与
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最近一直都在用B16摸索VEGF促进增殖的浓度和药物抑制的浓度的实验，但是的出来的结果总是不好。 我是用96孔板接种，每空接种约2500个细胞。然后培养约16-24h后用无血清培养基处理24h，然后加VEGF（用无血清DMEM培养基配制，每次都是现用现配），设置的浓度有200ng/ml，100ng/ml和50ng/ml，按照文献的说法是10ng/ml处理48h都能够有反应的，但是我用VEGF处理72h，中间不换液，然后用MTT检测，但是结果总是很不好，用无血清培养基处理的细胞作为对照，VEGF处理的有时候甚至比无血清的对照还要低，根本就看不出有什么变化。 而且还有一个问题就是每次接种完，在换无血清培养基处理24h后细胞数量看起来还是比较正常的，但是经过72h培养后就明显看出同一个处理不同孔细胞的密度不一样，照理来说我接种的时候都是先配好适当的浓度而且反复混匀后才接种的，是不是这样也会影响检测结果？但是VEGF处理的不论是哪个处理都没有明显差别~哪位虫友能指点一下?谢谢！ [ Last edited by 小雨莎莎 on 2012-6-19 at 20:51 ] |
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