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taoziljt

金虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
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虫号: 941362
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专业: 临床免疫学检验

[求助] elisa检测中结果不稳定已有1人参与

使用间接elisa做出来的结果前后两天差别很大，具体的说是前两天做的是OD值1.5，ic50 0.3，转天在做就OD值0.2了，颜色上不去，换了所有的缓冲液显色液还是颜色上不去，包被原也换了，不同包被原对比也做了，结果是不同的包被原颜色都浅，不同批次的抗体也同时做了对比，结果还是一样，现在找不出问题出现在哪，哪位大侠知道这是怎么回事啊？

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1楼 2012-06-16 00:34:49

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Linwenshi

木虫 (正式写手)

应助: 62 (初中生)
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红花: 7
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虫号: 1755152
注册: 2012-04-14
性别: MM
专业: 检验医学

【答案】应助回帖

1.可能温浴影响，96孔酶标板结构特别；易产生边缘效应，抗原抗体结合及酶促反应对温度有严格要求，酶标板周围与内部孔升降温速率不同，造成周边与内部孔结果差异；干浴与水浴存在明显的差异，尽可能使用水浴，并要求固相板放入水中，减少受热不均，贴密封膜，防止污物浸入。
2.冼涤是ELISA操作的重要环节，手冼条件一致性较差，对结果影响较大，半自动与全自动冼板机使用不当也会影响结果，血清中残留的的纤维蛋白丝或洗涤液析出的结晶易使洗板。

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