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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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I张小琴

管理员

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

[求助] DEAE sephadexs A-25填料

我用DEAE sephadexs A-25填料,是两年前经酸碱处理的一直保存在4℃、75%的乙醇中,那时用的效果不错,现在有些白色絮状或块状物,充分稀释溶解后,白色絮状或块状物还是存在,想问一下可能的原因。。。
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I张小琴

版主

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4楼2012-06-16 11:16:33
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daguo0648

实习版主

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
hsd3521: 金币+1, 感谢应助,欢迎关注食品版,谢谢 2012-06-14 18:32:30
I张小琴: 金币+2, ★★★★★最佳答案 2012-06-16 11:13:11
阴离子柱用后通常很脏,因为他会集合核酸等杂质,所以用后要及时处理,酸碱处理后要泡在20%乙醇中起到抑菌作用,你放在75%乙醇可能效果不好,而且放置这么久,乙醇浓度早会发降低了,估计长菌了。可以用0.2MNaOH浸泡3h左右,或者6MGuaHCl泡1-2h,在清洗一下。
小小爬虫
2楼2012-06-14 15:30:16
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I张小琴

版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

为了检测凝胶是否有用,我用平菇提取物经离心(之前有人做过实验,效果不错),再过阴离子交换柱,采用连续洗脱,结果有峰值,但有新问题,图如下:想知道8到22管为什么不是连续变化,是有两个蛋白没分开,还是在洗脱过程中柱子才被压实,还是其他的。。。。,求解哦!
3楼2012-06-16 11:11:38
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daguo0648

兑换贵宾

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★ ★
树树8013: 金币+2, 继续奖励,谢谢对问题的持续关注,食品板块欢迎你常来。 2012-07-25 20:07:58
引用回帖:
4楼: Originally posted by I张小琴 at 2012-06-16 11:16:33
图:
91/d8/1469636_1339816592_589.jpg

你这过的阴离子交换柱,有些蛋白本身靠盐梯度洗脱就不一定能分开,这与蛋白的pI性质有关;还有是不是有两个蛋白没有分开,还需要跑一下SDS电泳图才能确认,如果没分开也可能是你的梯度递增太快,前一蛋白还没完全洗下,而盐的浓度正好又达到后一蛋白洗脱值,于是峰型就连接了,你可以再拉大梯度洗脱。
小小爬虫
5楼2012-07-24 12:27:37
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