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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 如何用DNS法测α-淀粉酶酶活
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
引用回帖:
10楼: Originally posted by misure9905 at 2015-08-18 17:07:56
请问您的0.1M柠檬酸-0.2M磷酸氢二钠缓冲液，pH是多少...

不限定的，范围是3-7.5.
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
11楼2015-08-18 20:10:20
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793876456

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yhjcwangyw at 2012-06-07 17:25:57
DNS法其实是测定还原糖含量的一种常用的方法，而淀粉酶可以水解淀粉成为还原糖（葡萄糖），所以你只需取一定量的淀粉，加一定量的淀粉酶，控制好酶作用的条件，然后灭酶活，接着采用DNS法测定其中的还原糖含量，从而 ...

有个问题不懂，淀粉酶只是把淀粉水解为二糖，二糖跟葡萄糖还是有区别的吧？
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12楼2015-11-15 10:20:06
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苦洲

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by protein_ at 2012-06-08 10:17:16
取1mL酶液于试管中，70℃保温15min，迅速冷却后，在40℃下预热15min，然后加入2mL40℃预热好的1%可溶性淀粉，摇匀后40℃下反应5min，迅速冷却并加入4mL0.4M氢氧化钠终止反应，然后取1mL反应液于试管中，加入1mLDNS， ...

我也想知道此法的计算公式
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13楼2016-01-04 09:20:01
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My-life

捐助贵宾 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 苦洲 at 2016-01-04 09:20:01
我也想知道此法的计算公式...

α-淀粉酶活性（麦芽糖mg/g）=(A-a)*V/W*V0
   A:α-淀粉酶水解淀粉生成的麦芽糖量
  a：α-淀粉酶对照管中麦芽糖量
V：样品稀释体积
V0：比色时所取样品毫升数
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14楼2016-01-06 11:58:34
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54小霞霞

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
14楼: Originally posted by My-life at 2016-01-06 11:58:34
α-淀粉酶活性（麦芽糖mg/g）=(A-a)*V/W*V0
   A:α-淀粉酶水解淀粉生成的麦芽糖量
  a：α-淀粉酶对照管中麦芽糖量
V：样品稀释体积
V0：比色时所取样品毫升数...

为毛我测出来的对照值都比测量值大，求解
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15楼2016-01-11 19:44:25
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My-life

捐助贵宾 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by 54小霞霞 at 2016-01-11 19:44:25
为毛我测出来的对照值都比测量值大，求解...

把酶液稀释一下吧

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16楼2016-01-12 15:00:29
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54小霞霞

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
16楼: Originally posted by My-life at 2016-01-12 15:00:29
把酶液稀释一下吧
...

还是一样，对照组大，不知道问题出在哪
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17楼2016-01-15 09:40:56
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aoaoshch

木虫 (小有名气)
DNS测的是还原糖，底物是淀粉，里面会有一些小的还原糖，会使对照颜色很深，一定程度上影响测定。
建议用碘法测定。
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18楼2016-01-15 15:03:44
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My-life

捐助贵宾 (小有名气)
引用回帖:
17楼: Originally posted by 54小霞霞 at 2016-01-15 09:40:56
还是一样，对照组大，不知道问题出在哪...

我也是刚涉及实验内容，初次我把酶液稀释了1万倍。

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19楼2016-01-16 11:12:33
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54小霞霞

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
19楼: Originally posted by My-life at 2016-01-16 11:12:33
我也是刚涉及实验内容，初次我把酶液稀释了1万倍。
...

把吸光值控制在一定范围不就可以了么，那你做的测量组普遍比对照组大么？
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20楼2016-01-16 23:16:22
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