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luba

新虫 (小有名气)

[求助] 穿刺保藏的菌被冻在-80度冰箱会不会有影响?

我在公司合成的基因,人家昨天下午送来的一管穿刺保藏菌,我给冻在-80度冻了一天。昨晚蘸了一下划了个平板,今早看发现长的很少很慢,觉得不对劲,上网一查发现穿刺保藏菌是应该冻4度的。刚刚把它拿出来放到4度了。不知道会有影响不?菌里的序列会不会有突变什么的啊?5600多块钱合成的基因呢,不要就这么被我毁了。。。
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yhjcwangyw

铁杆木虫 (正式写手)

穿刺保藏和斜面保藏是一个道理,只是穿刺保藏是厌氧菌,斜面保藏是蓄养氧菌,因此放到零下80的冰箱里,肯定影响。零下80一般是用甘油做的冻干管菌种保藏,因为在超低温下甘油可以保护菌体不受损伤。
分享信息,提高自己
2楼2012-06-08 09:48:09
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
luba: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2012-06-11 12:34:18
细菌在低温下如果没有保护剂,会死得很快,只能期待人品好了。现在长得很慢,但好歹是长了,长了就行,质粒在细菌里大概是不受影响的,菌长了,只要加了选择性压力,质粒也会扩增的。至于担心序列变化,等菌体长好了送测看序列就行。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
3楼2012-06-09 04:40:01
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luba

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2012-06-09 04:40:01
细菌在低温下如果没有保护剂,会死得很快,只能期待人品好了。现在长得很慢,但好歹是长了,长了就行,质粒在细菌里大概是不受影响的,菌长了,只要加了选择性压力,质粒也会扩增的。至于担心序列变化,等菌体长好了 ...

谢谢,不过我还有疑问,一般用的不都是大肠杆菌吗?为什么要用厌氧菌的保藏方法?它缺氧了不也得死吗?还有我用这个菌划线时该怎么划呢?为什么我划出来的长的很少?是应该蘸一下就行还是要把菌和琼脂混匀了再划?如果混匀了岂不是又起不到厌氧的效果了?唉,真是搞死我了。。。。
4楼2012-06-11 12:36:52
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

引用回帖:
4楼: Originally posted by luba at 2012-06-11 12:36:52
谢谢,不过我还有疑问,一般用的不都是大肠杆菌吗?为什么要用厌氧菌的保藏方法?它缺氧了不也得死吗?还有我用这个菌划线时该怎么划呢?为什么我划出来的长的很少?是应该蘸一下就行还是要把菌和琼脂混匀了再划? ...

大肠杆菌是兼性厌氧的,不用担心。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
5楼2012-06-11 12:39:31
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