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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】请教有关灭菌的问题
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小羊羊

金虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】请教有关灭菌的问题 已有17人参与

请教各位高手，滤器灭菌有什么要求么？我用121度20分钟的，可是用它来过滤细胞培养液，还是发现染菌了，重新更换0.2微米滤膜灭菌操作后，再过滤还是有染菌，这是什么原因呢？我的培养液配完都快一周了，重复滤了两次都不行，还能再用么？谢谢！
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1楼 2010-07-28 11:07:51
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yushanyou12

铁杆木虫 (正式写手)
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看天(金币+3):鼓励回答 2010-07-28 15:17:24
先把滤膜装到滤器上安装好，然后再把整个滤器放到一个铜的或不锈钢的灭菌桶里（跟装平板那个差不多，就是小点），之后在放到灭菌锅里灭菌，121度20分钟就可以了。灭完菌凉了之后整个拿到无菌室里，然后操作时再在层流台下打开灭菌桶取出滤器使用，这样就能最大限度的避免染菌了

另外要说的是，你想过滤除菌的话应该是要用0.22的滤膜，0.45的是用来做微生物无菌检查时用的，还达不到完全除菌的要求。

这是滤器的染菌注意事项。但是操作中时环环相扣的，哪一步染菌了整个实验都会失败。所以你还应该全面查找染菌的原因，看看问题可能会出在哪里。比如操作的环境级别、使用的其他器具是否染菌、操作时的方法是否科学正确等等
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今夜的寂寞，让我如此美丽。
8楼2010-07-28 15:10:12
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普通回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-07-28 11:57:04
是不是你的滤膜没放好固定好？还是说破了或者没密封好漏液了？
滤器灭菌用这个条件没问题
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2楼2010-07-28 11:20:50
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henkally

禁虫 (著名写手)
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1949stone(金币+2):谢谢交流 2010-07-28 11:57:16
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3楼2010-07-28 11:21:06
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henkally

禁虫 (著名写手)
本帖内容被屏蔽
4楼2010-07-28 11:23:05
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bunny0512

银虫 (小有名气)
★
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对啊  我们0.22除菌的,拿过来直接用啊,高压的话,会不会起到反效果呢...毕竟是塑料制品啊..
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在哪里~在哪里见过你~
5楼2010-07-28 11:31:29
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
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lstt09nk(金币+1):感谢交流~~ 2010-07-28 12:57:21
楼上几位都没有get到啊~~~~
一次要滤个一升两升的，当然要用大滤器，配上滤膜，用小的一次性滤器滤到手指头都痛~而且又恨浪费
.45um的滤菌固然可以，但是不一定非常保险
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6楼2010-07-28 12:42:30
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liyangmiscap

木虫 (著名写手)
★
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可以使用独立包装的滤膜，避免灭菌了
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愿与你携手，沿河看柳
7楼2010-07-28 14:36:11
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cqyniu

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
用锡箔纸把滤膜包好了，一个一个的独立的包好，然后放在一个能高压灭菌的容器中高压灭菌。我以前过滤除菌也是出问题，滤膜灭菌后就解决了。
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9楼2010-07-28 15:25:26
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zhangxz01

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
滤器密封性不好或滤膜破损，需要做相关实验验证的
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专心做发酵
10楼2010-07-28 16:34:18
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