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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】请教有关灭菌的问题
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seahow

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
先做无菌实验吧； 很可能是操作的问题，或者是超净台问题。
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11楼2010-07-28 16:48:32
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tongyanna

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
锡箔纸把滤膜包好了，一个一个的独立的包好灭菌
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自己的路，自己快乐的走
12楼2010-07-28 19:32:06
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waiter

木虫 (著名写手)

蛋白纯化系统（国产AKTA）销售


★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
培养液配完都快一周了， 还是重新配吧。
逐个东西一周了肯定容易染菌啊。而且菌多的话过滤就效果没那么好了。

滤器的话我们都是灭菌后用的。121度 20分钟。拿出来层流下吹冷。（液体滤器做完完整性后装在那个不锈钢套套里面灭菌。要是一次性那种都不做完整性的，过滤网后做个起泡点实验就好了。）
染菌的话是不是别的原因，楼主把滤后的培养基空白对照看看吧。空白都长菌了的话才能确定是滤器问题了。也就是有人说的那个验证实验。


楼主操作是关键。
好运。
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13楼2010-07-28 21:56:31
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可可猫

铜虫 (小有名气)
我们每次都是加两张或者三张滤膜一起灭的  而且是在滤器里加好了再灭菌
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14楼2010-07-28 21:59:59
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可可猫

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
还有滤完后做个菌检
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15楼2010-07-28 22:00:52
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★
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个人感觉是没有灭菌完全！
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
16楼2010-07-28 23:11:01
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风荻

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
过滤器我们从来没有灭菌的，就是把它用双蒸水洗干净用，关键是你过滤过程中的操作啊！！这个要很小心的！！
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17楼2010-07-29 08:36:55
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lksweepty

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我们以前是这么做的：
把滤器洗完烘干，把0.22的滤膜放好，夹起来，然后用铝箔纸包好，121度20-25min就好了。要注意的可能就是一定要把滤膜给放好吧。我们后来换成millpore的滤头了（1个可以滤3L培养基），所以这种方法只用了1年左右，没有染过菌，所以我也不知道还有什么需要额外注意的。
希望楼下能补充！！
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18楼2010-07-29 11:06:51
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sjfty

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
可能是密封性不好的问题。
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19楼2012-01-18 17:56:49
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
18楼: Originally posted by lksweepty at 2010-07-29 11:06:51:
我们以前是这么做的：
把滤器洗完烘干，把0.22的滤膜放好，夹起来，然后用铝箔纸包好，121度20-25min就好了。要注意的可能就是一定要把滤膜给放好吧。我们后来换成millpore的滤头了（1个可以滤3L培养基），所以这 ...

顶这个，很容易被忽略的问题。滤膜事先要放到过滤器里面，然后锡箔纸包好再灭菌。放滤膜的时候如果没放好，留下空隙，过滤时液体没有经过滤膜就过去了，自然就除不了菌。
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20楼2012-01-18 18:53:17
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