【求助/交流】请教有关灭菌的问题 - 分子生物 - 综合其他

11楼2010-07-28 16:48:32

tongyanna

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锡箔纸把滤膜包好了，一个一个的独立的包好灭菌

自己的路，自己快乐的走

12楼2010-07-28 19:32:06

waiter

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蛋白纯化系统（国产AKTA）销售

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培养液配完都快一周了，还是重新配吧。
逐个东西一周了肯定容易染菌啊。而且菌多的话过滤就效果没那么好了。

滤器的话我们都是灭菌后用的。121度 20分钟。拿出来层流下吹冷。（液体滤器做完完整性后装在那个不锈钢套套里面灭菌。要是一次性那种都不做完整性的，过滤网后做个起泡点实验就好了。）
染菌的话是不是别的原因，楼主把滤后的培养基空白对照看看吧。空白都长菌了的话才能确定是滤器问题了。也就是有人说的那个验证实验。

楼主操作是关键。
好运。

13楼2010-07-28 21:56:31

可可猫

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我们每次都是加两张或者三张滤膜一起灭的而且是在滤器里加好了再灭菌

赞一下

14楼2010-07-28 21:59:59

可可猫

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还有滤完后做个菌检

15楼2010-07-28 22:00:52

天使托

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T.Shen

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个人感觉是没有灭菌完全！

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16楼2010-07-28 23:11:01

风荻

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过滤器我们从来没有灭菌的，就是把它用双蒸水洗干净用，关键是你过滤过程中的操作啊！！这个要很小心的！！

17楼2010-07-29 08:36:55

lksweepty

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我们以前是这么做的：
把滤器洗完烘干，把0.22的滤膜放好，夹起来，然后用铝箔纸包好，121度20-25min就好了。要注意的可能就是一定要把滤膜给放好吧。我们后来换成millpore的滤头了（1个可以滤3L培养基），所以这种方法只用了1年左右，没有染过菌，所以我也不知道还有什么需要额外注意的。
希望楼下能补充！！

18楼2010-07-29 11:06:51

sjfty

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可能是密封性不好的问题。

19楼2012-01-18 17:56:49

西瓜

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引用回帖:

18楼: Originally posted by lksweepty at 2010-07-29 11:06:51:
我们以前是这么做的：
把滤器洗完烘干，把0.22的滤膜放好，夹起来，然后用铝箔纸包好，121度20-25min就好了。要注意的可能就是一定要把滤膜给放好吧。我们后来换成millpore的滤头了（1个可以滤3L培养基），所以这 ...

顶这个，很容易被忽略的问题。滤膜事先要放到过滤器里面，然后锡箔纸包好再灭菌。放滤膜的时候如果没放好，留下空隙，过滤时液体没有经过滤膜就过去了，自然就除不了菌。

20楼2012-01-18 18:53:17