应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 80p 割胶回收
263/3返回列表上一页123
查看: 1849  |  回复: 25
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

vir2008

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流 2012-06-11 13:59:06
引用回帖:
20楼: Originally posted by 晴天雅子 at 2012-06-08 12:21:52
请问两条配对的核苷酸链怎么合成啊，我之前是合成的模板引物。请问您这样做过吗，现在很是纠结啊...

目的片段配对，只是两端设计成酶切后的缺口状。
举个例子，若希望某片段5'有BamHI，3'有EcoRI酶切后的末端，则在正义链5'端添加GATCC，在反义链3'端加一个G；同时在反义链5'端加AATTC，在正义链3'端也添加一个G。两条链混合后预变性、逐渐冷却，就得到产物了。
只不过我做的是63bp的目的片段，不知道80bp是否可行。
赞一下(1人) 回复此楼
21楼2012-06-08 17:35:26
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

beautybanana

木虫 (著名写手)
呵呵，可以免费帮你回收，不过远水解不了近火啊~
赞一下 回复此楼
22楼2012-06-08 19:43:49
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

371522029

金虫 (正式写手)

小鱼儿

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-06-11 13:59:15
引用回帖:
10楼: Originally posted by 晴天雅子 at 2012-06-06 17:16:24
跑的胶目的条带很亮的，关键是割胶回收用的1.5ml的ep管也不大啊，加上溶解液和异丙醇就很多了。上柱子的时候也装不下呢...

你的条带有没有smil现象，就是拖尾的亮带。如果没有拖尾说明你提取的基因比较好，大小比较一致，那么你就可以用稍微硬一点的胶，点样量大些，一般是全点一个孔，然后电泳，可以得到一个很窄的很亮的条带，切胶就比较好切了，只要切一点点就胶可以了，这样回收时候琼脂糖胶带就比较少了。
赞一下 回复此楼
23楼2012-06-09 19:17:59
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jqq1985

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-06-11 13:59:24
不知道你为什么只要80bp，我觉得可以PCR时带上你的片段前面后者后面序列让片段大点，再往下做，如果多余的序列不影响后续试验就留着，有影响可以用反向PCR 去掉这些多余的序列。
赞一下 回复此楼
24楼2012-06-10 14:38:51
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晴天雅子

新虫 (小有名气)
谢谢大家的热情帮助啊。
赞一下 回复此楼
白岩松—不平静，就不会幸福！
25楼2012-06-11 12:32:03
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gungunak47

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

可以用磁珠法啊  给你推荐 河南惠尔纳米科技有限公司的磁珠法胶回收试剂盒 效果不错  比柱子法回收效率高
赞一下 回复此楼
26楼2012-06-13 17:39:24
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 晴天雅子 的主题更新
263/3返回列表上一页123
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭