24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 1802  |  回复: 8
本帖产生 1 个 BioEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zhougama

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

Ni柱再生方法

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wintersand

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhougama: 金币+15, ★★★很有帮助, 非常感谢你的回答,受益匪浅! 2012-06-08 19:29:11
不需要每次都重生柱子,可以用一段时间以后再重生。如果担心柱子不干净,可以每次用0.1M的氢氧化钠或者含有500mM咪唑的8M尿素洗两个柱体积就好了,不过洗完后一定要用水冲干净,不然下次用的时候蛋白就变性了。
至于蛋白和咪唑同Ni离子的亲和力问题我是这样认为的,蛋白上具有6个咪唑基团能与Ni 离子结合,因此会比单个的咪唑分子结合得更强,buffer洗不下来蛋白却能洗下咪唑;而咪唑能把蛋白竞争下来是靠浓度来实现的,只有较高浓度的咪唑才能把Ni离子全部抢过来。
8楼2012-06-08 11:31:49
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

danbomingyue

禁虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhougama: 金币+5, 有帮助 2012-06-07 08:41:43
本帖内容被屏蔽

2楼2012-06-06 08:51:48
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

danbomingyue

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

3楼2012-06-06 08:52:35
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ghost202

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
silicare: 金币+2, 谢谢参与 2012-06-06 15:11:08
zhougama: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-06-07 08:41:26
这个问题很简单的,不需要将咪唑完全洗下来。只需要下次用的时候用binding buffer平衡一下就可以了。你要明确蛋白纯化的原理,当咪唑浓度低的时候,蛋白的竞争能力是会比咪唑强的。
4楼2012-06-06 11:54:22
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见