24小时热门版块排行榜    

查看: 1975  |  回复: 8
本帖产生 1 个 BioEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zhougama

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

Ni柱再生方法

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wintersand

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhougama: 金币+15, ★★★很有帮助, 非常感谢你的回答,受益匪浅! 2012-06-08 19:29:11
不需要每次都重生柱子,可以用一段时间以后再重生。如果担心柱子不干净,可以每次用0.1M的氢氧化钠或者含有500mM咪唑的8M尿素洗两个柱体积就好了,不过洗完后一定要用水冲干净,不然下次用的时候蛋白就变性了。
至于蛋白和咪唑同Ni离子的亲和力问题我是这样认为的,蛋白上具有6个咪唑基团能与Ni 离子结合,因此会比单个的咪唑分子结合得更强,buffer洗不下来蛋白却能洗下咪唑;而咪唑能把蛋白竞争下来是靠浓度来实现的,只有较高浓度的咪唑才能把Ni离子全部抢过来。
8楼2012-06-08 11:31:49
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

danbomingyue

禁虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhougama: 金币+5, 有帮助 2012-06-07 08:41:43
本帖内容被屏蔽

2楼2012-06-06 08:51:48
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

danbomingyue

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

3楼2012-06-06 08:52:35
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ghost202

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
silicare: 金币+2, 谢谢参与 2012-06-06 15:11:08
zhougama: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-06-07 08:41:26
这个问题很简单的,不需要将咪唑完全洗下来。只需要下次用的时候用binding buffer平衡一下就可以了。你要明确蛋白纯化的原理,当咪唑浓度低的时候,蛋白的竞争能力是会比咪唑强的。
4楼2012-06-06 11:54:22
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 271材料工程求调剂 +6 .6lL 2026-03-18 6/300 2026-03-19 15:41 by haoshis
[考研] 304求调剂 +3 曼殊2266 2026-03-18 3/150 2026-03-19 14:42 by peike
[考研] 0703化学调剂 +5 pupcoco 2026-03-17 8/400 2026-03-19 13:58 by houyaoxu
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-19 3/150 2026-03-19 13:36 by houyaoxu
[考研] 一志愿中海洋材料工程专硕330分求调剂 +7 小材化本科 2026-03-18 7/350 2026-03-19 10:46 by Linda Hu
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂(0854都可以) +3 xbxudjdn 2026-03-18 3/150 2026-03-18 22:14 by zhq0425
[考研] 330求调剂 +3 小材化本科 2026-03-18 3/150 2026-03-18 21:55 by 无懈可击111
[考研] 298-一志愿中国农业大学-求调剂 +7 手机用户 2026-03-17 7/350 2026-03-18 14:34 by vgtyfty
[考研] 331求调剂(0703有机化学 +7 ZY-05 2026-03-13 8/400 2026-03-18 14:13 by 007_lilei
[考研] 280求调剂 +6 咕噜晓晓 2026-03-18 7/350 2026-03-18 11:25 by 无际的草原
[考研] 0703化学336分求调剂 +6 zbzihdhd 2026-03-15 7/350 2026-03-18 09:53 by zhukairuo
[考研] 考研求调剂 +3 橘颂. 2026-03-17 4/200 2026-03-17 21:43 by 有只狸奴
[考研] 326求调剂 +5 上岸的小葡 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:26 by ruiyingmiao
[考研] 11408 一志愿西电,277分求调剂 +3 zhouzhen654 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:03 by laoshidan
[考研] 机械专硕325,寻找调剂院校 +3 y9999 2026-03-15 5/250 2026-03-16 19:58 by y9999
[考研] 中科院材料273求调剂 +4 yzydy 2026-03-15 4/200 2026-03-16 15:59 by Gaodh_82
[考研] 26考研一志愿中国石油大学(华东)305分求调剂 +3 嘉年新程 2026-03-15 3/150 2026-03-15 13:58 by 哈哈哈哈嘿嘿嘿
[考研] 297求调剂 +4 学海漂泊 2026-03-13 4/200 2026-03-14 11:51 by 热情沙漠
[考研] 266求调剂 +4 学员97LZgn 2026-03-13 4/200 2026-03-14 08:37 by zhukairuo
[硕博家园] 085600 260分求调剂 +3 天空还下雨么 2026-03-13 5/250 2026-03-13 18:46 by 天空还下雨么
信息提示
请填处理意见