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collon

新虫 (初入文坛)

[求助] 免疫亲和层析柱怎样选择填料呀?

小女子要用单抗纯化花生的某个致敏蛋白,过免疫亲和柱,请问,该如何选择柱子和载体介质呢?求各位大神指导,我对这方面一头雾水呀。。。。。
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collon

新虫 (初入文坛)

求指点啊
2楼2012-11-19 16:23:32
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yongbo_liang

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
yqbter: 金币+1, 鼓励老虫发帖! 2012-11-20 17:12:13
collon: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢呀 2012-11-23 09:41:12
介质你选择琼脂糖(磁珠或其他的都可以),最好是NHS(或HBr有毒)活化好的(否则你要自己活化啊),然后偶联上你的抗体就可以了,要检测你的偶联效率。接下去就是纯化了。
3楼2012-11-20 16:45:35
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rhguo

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2012-11-22 05:03:15
如你上一个帖子,用ge cnbr活化好的sepharose 4b 或者fast flow都 可以。
4楼2012-11-22 00:45:28
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collon

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by yongbo_liang at 2012-11-20 16:45:35
介质你选择琼脂糖(磁珠或其他的都可以),最好是NHS(或HBr有毒)活化好的(否则你要自己活化啊),然后偶联上你的抗体就可以了,要检测你的偶联效率。接下去就是纯化了。

谢谢呀~那我想问下~是不是要等抗体有了才能去检测偶联效率呀?我的抗体要5个月才能制完,那之前是不是都不能完全选好介质了呢?
5楼2012-11-23 09:40:57
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collon

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by rhguo at 2012-11-22 00:45:28
如你上一个帖子,用ge cnbr活化好的sepharose 4b 或者fast flow都 可以。

谢谢呀~
6楼2012-11-23 09:42:34
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yongbo_liang

新虫 (小有名气)

你不偶联上去抗体你怎么检测,更没法纯化你的抗原了。
7楼2012-11-23 09:58:44
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collon

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by yongbo_liang at 2012-11-23 09:58:44
你不偶联上去抗体你怎么检测,更没法纯化你的抗原了。

嗯,现在还在选介质,那这样子是不是意味着不能提前选了呢?
8楼2012-11-23 14:36:30
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