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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 如何扩增中间片段？
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faustvampire

铁虫 (初入文坛)

[求助] 如何扩增中间片段？

Sample Text已知某物种的该基因想要克隆与其相近的物种的基因，开始是不是要先扩增中间片段？那么扩增中间片段的方法是不是要设计简并引物呢，我设计了几对简并引物都没扩增出来，怎么办呢？全长大概就700-800bp。有万能引物么？或者别的方法?
求高人指点。
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不太会
1楼 2012-06-05 13:38:43
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faustvampire

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 若溪 at 2012-06-05 14:37:26
个人感觉应该查看亲缘关系较近的菌株的此基因序列，用BioEdit或其它软件查看保守序列，然后根据保守序列设计引物，

我就是这样做的可是 设计了好几对引物还是 不行 有没有别的方法 比如万能引物什么的
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不太会
4楼2012-06-05 17:24:31
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若溪

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-06-08 14:08:44
个人感觉应该查看亲缘关系较近的菌株的此基因序列，用BioEdit或其它软件查看保守序列，然后根据保守序列设计引物，
赞一下 回复此楼
没有比脚更长的路，没有比人更高的山
3楼2012-06-05 14:37:26
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l68266152

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
多找几个同源度高的序列，选取3‘段高保守的序列。目的片段长度100以上就可以了。
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相信自己
5楼2012-06-06 09:00:47
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xzx018

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
兼并引物p不出来正常，可能是引物没设计好，也可能体系没问题，700-800应该较好p
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6楼2012-06-06 09:59:40
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