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wyz4626

银虫 (小有名气)

[交流] 不热激,可否转化? 已有14人参与

昨天转化前,一走神,忘了热激就摇上了。我一咬牙继续做了,不知能否长出来?
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wyz4626

银虫 (小有名气)

wyz4626: 回帖置顶 2012-06-04 20:23:54
引用回帖:
6楼: Originally posted by dshlove at 2012-06-04 14:20:00
你首先要明白热激的原理。
在0 ℃的CaCl2 低渗溶液中,细菌细胞发生膨胀, Ca 2+使细胞膜磷脂层形成液晶结构,促使细胞外膜与内膜间隙中部分核酸酶解离,诱导形成感受态。此外,Ca 2+ 能与加入的DNA分子结合,形 ...

其实当时我想重做的,但为了验证能否不热激转化,走完了全过程。
很意外,不仅可以转化,而且转化效率比热激还好。4个板共挑了32个菌,只有一个是假阳性。已送测序
10楼2012-06-04 20:20:08
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beer胖

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
估计,很难
尤其是前一步骤是在冰上的,热击就是为了让细胞壁扩张,方便外源基因进入。
不过可以做做试,看结果怎样,也是一种实验经历。
祝成功!
2楼2012-06-04 09:48:28
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ilxly

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
如过转质粒扩增的话肯定没问题 如果转的是连接产物估计就悬了
3楼2012-06-04 10:37:15
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江流儿

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
同意楼上
出来结果跟大家分享一下啊~~~
4楼2012-06-04 11:08:55
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