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skjtg金虫 (初入文坛)
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[求助]
求助氨基酸脱羧酶试验培养基使用经验
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氨基酸脱羧酶试验培养基 成分 蛋白胨 5g 酵母浸膏 3g 葡萄糖 1g 蒸馏水 1000mL 1.6%滇甲酚紫－乙醇溶液 1mL L－氨基酸或DL－氨基酸 0.5或1g/100mL pH6.8 制法 除氨基酸以外的成分加热溶解后，分装每瓶100mL，分别加入各种氨基酸：赖氨酸、精氨酸和鸟氨酸。L－氨基酸按0.5%加入，DL－氨基酸按1%加入。再行校正pH至6.8。对照培养基不加氨基酸。分装于灭菌的小试管内，每管0.5mL，上面滴加一层液体石蜡，115℃高压灭菌10min。 试验方法 从琼脂斜面上挑取培养物接种，于36±1℃培养18～24h，观察结果。氨基酸脱羧酶阳性者由于产碱，培养基应呈紫色。阴性者无碱性产物，但因葡萄糖产酸而使培养基变为黄色。对照管应为黄色。 我用上述的方法制作培养基，但用的是加1.5%琼脂的平板，从文库中筛选产脱羧酶的基因。点板后18h后发现：1、培养基没有因为葡萄糖发酵产酸变黄，还是呈淡紫色 2、每个点都长出了大肠杆菌(文库载体为大肠杆菌) 在此向各位虫友请教下这个培养基的使用经验，请多多帮忙！ |
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