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skjtg金虫 (初入文坛)
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[求助]
求助氨基酸脱羧酶试验培养基使用经验
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氨基酸脱羧酶试验培养基 成分 蛋白胨 5g 酵母浸膏 3g 葡萄糖 1g 蒸馏水 1000mL 1.6%滇甲酚紫-乙醇溶液 1mL L-氨基酸或DL-氨基酸 0.5或1g/100mL pH6.8 制法 除氨基酸以外的成分加热溶解后,分装每瓶100mL,分别加入各种氨基酸:赖氨酸、精氨酸和鸟氨酸。L-氨基酸按0.5%加入,DL-氨基酸按1%加入。再行校正pH至6.8。对照培养基不加氨基酸。分装于灭菌的小试管内,每管0.5mL,上面滴加一层液体石蜡,115℃高压灭菌10min。 试验方法 从琼脂斜面上挑取培养物接种,于36±1℃培养18~24h,观察结果。氨基酸脱羧酶阳性者由于产碱,培养基应呈紫色。阴性者无碱性产物,但因葡萄糖产酸而使培养基变为黄色。对照管应为黄色。 我用上述的方法制作培养基,但用的是加1.5%琼脂的平板,从文库中筛选产脱羧酶的基因。点板后18h后发现:1、培养基没有因为葡萄糖发酵产酸变黄,还是呈淡紫色 2、每个点都长出了大肠杆菌(文库载体为大肠杆菌) 在此向各位虫友请教下这个培养基的使用经验,请多多帮忙! |
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