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lavender_li

银虫 (小有名气)

[求助] 关于HPLC移动相的疑问

本人最近用HPLC,但是是个彻底的菜鸟。发现我配的移动相的出峰时间跟前辈的不一样。
我用的是methanol:100 mM ammonium acetate:水=85:10:5的移动相
后来发现,我配的时候先加methanol,然后加ammonium acetate最后加水。
但是前辈加的顺序是ammonium acetate,水,最后是甲醇。
果然,我调整了一下试剂的添加顺序,出峰的时间就一样了。
请教个问高人,移动相配制时,试剂的添加顺序有这么重要么?为什么调整了一下顺序,出峰时间就变了呢?
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wddmq

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by lavender_li at 2012-06-02 14:28:18
是这样啊……那是不是现在这样三种东西分着加也是不对的啊。是不是应该先把水和乙酸铵混合好了,再加到甲醇里面?...

只有我们叫流动相么。对,缓冲盐应该先和水混合好后再和有机相混合。
1234
10楼2012-06-03 21:45:55
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qxie

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你是怎么混合的?再量筒里面混合吗?还是一个一个分别用量筒量到配流动相的瓶子里面的?
2楼2012-06-02 12:27:58
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lavender_li

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by qxie at 2012-06-02 12:27:58
你是怎么混合的?再量筒里面混合吗?还是一个一个分别用量筒量到配流动相的瓶子里面的?

我是直接在量筒里混合的,然后加转子,磁力搅拌混合。
但是前辈也是直接拿量筒混合的。
我们两个人不一样的好像只有加入试剂的顺序
3楼2012-06-02 13:31:11
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wddmq

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
移动相。。很特殊的说法
1234
4楼2012-06-02 13:38:18
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