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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 关于HPLC移动相的疑问
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lavender_li

银虫 (小有名气)

[求助] 关于HPLC移动相的疑问

本人最近用HPLC，但是是个彻底的菜鸟。发现我配的移动相的出峰时间跟前辈的不一样。
我用的是methanol：100 mM ammonium acetate：水=85:10:5的移动相
后来发现，我配的时候先加methanol，然后加ammonium acetate最后加水。
但是前辈加的顺序是ammonium acetate，水，最后是甲醇。
果然，我调整了一下试剂的添加顺序，出峰的时间就一样了。
请教个问高人，移动相配制时，试剂的添加顺序有这么重要么？为什么调整了一下顺序，出峰时间就变了呢？
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1楼 2012-06-02 12:15:03
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

wddmq

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by wddmq at 2012-06-02 13:38:18
移动相。。很特殊的说法

没说完就发出去了。。。说回正题，乙酸铵虽是配好的溶液，但是也不能直接就和甲醇混合，可能会析出，应先和水混合后再与甲醇混合。
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1234
5楼2012-06-02 13:41:03
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
lavender_li: 金币+2, ★★★★★最佳答案 2012-06-04 09:58:44
先加methanol，然后加ammonium acetate，盐会析出。体系pH发生变化，保留时间变化。
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守候在风中的宁静。
11楼2012-06-04 08:31:21
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普通回帖

qxie

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你是怎么混合的？再量筒里面混合吗？还是一个一个分别用量筒量到配流动相的瓶子里面的？
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2楼2012-06-02 12:27:58
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lavender_li

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by qxie at 2012-06-02 12:27:58
你是怎么混合的？再量筒里面混合吗？还是一个一个分别用量筒量到配流动相的瓶子里面的？

我是直接在量筒里混合的，然后加转子，磁力搅拌混合。
但是前辈也是直接拿量筒混合的。
我们两个人不一样的好像只有加入试剂的顺序
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3楼2012-06-02 13:31:11
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wddmq

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
移动相。。很特殊的说法
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1234
4楼2012-06-02 13:38:18
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soundhorizo

荣誉版主 (文坛精英)

九九

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
5楼: Originally posted by wddmq at 2012-06-02 14:41:03
没说完就发出去了。。。说回正题，乙酸铵虽是配好的溶液，但是也不能直接就和甲醇混合，可能会析出，应先和水混合后再与甲醇混合。...

酸+水+甲醇
原因就是楼上所说~

ps  我们也叫移动相
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来到这个世界的理由，是因为世上有那么件事儿，唯有我可以做到。
6楼2012-06-02 14:03:21
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lavender_li

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wddmq at 2012-06-02 13:38:18
移动相。。很特殊的说法

不叫移动相那应该叫啥？
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7楼2012-06-02 14:24:58
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lavender_li

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by wddmq at 2012-06-02 13:41:03
没说完就发出去了。。。说回正题，乙酸铵虽是配好的溶液，但是也不能直接就和甲醇混合，可能会析出，应先和水混合后再与甲醇混合。...

是这样啊……那是不是现在这样三种东西分着加也是不对的啊。是不是应该先把水和乙酸铵混合好了，再加到甲醇里面？
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8楼2012-06-02 14:28:18
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lavender_li

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by soundhorizo at 2012-06-02 14:03:21
酸+水+甲醇
原因就是楼上所说~

ps  我们也叫移动相 ...

我看到了呵呵。原来是这样。谢谢
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9楼2012-06-02 14:30:25
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wddmq

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by lavender_li at 2012-06-02 14:28:18
是这样啊……那是不是现在这样三种东西分着加也是不对的啊。是不是应该先把水和乙酸铵混合好了，再加到甲醇里面？...

只有我们叫流动相么。对，缓冲盐应该先和水混合好后再和有机相混合。
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1234
10楼2012-06-03 21:45:55
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