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梅雨时节

铜虫 (小有名气)

[求助] 色谱峰分叉,又找不到原因,请高人指点! 已有1人参与

现在做一液相实验,色谱柱刚买来时,出峰还好,用了两周,主峰突然地分叉!查找原因:改变柱温、更换流动相、改变样品制备的PH值、倒用,以至于打开一端,也没有塌陷;更甚者同一个流动相,今天主峰正常,第二天主峰就会分叉。急急急,各位高人赶快指点一下,不胜感谢!
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wddmq

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by 梅雨时节 at 2012-06-02 20:50:10
像楼主这么说,就只有更换柱子啦?这柱子花了将近5周从美国订购的啊!...

柱子不是非到不得已,不要自己拆,不然填料松了,就没办法了。我是换了根差不多的柱子继续做的。我那个样品中含有大量的糖,我极度怀疑是因为这个才把柱子给用的出现问题了(个人猜测没有根据),虽然也用水冲了很长时间,但效果不大,由于别的项目用起来还正常,所以也没有再继续处理了,其实这样是不太负责的。。。。其实还有很多方法冲柱子。建议用异丙醇冲冲看再说。
1234
18楼2012-06-03 21:54:18
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1、可能是样品过载,升高点柱温并减少进样量看看。
2、进样针有残留,致使过载,设置清洗程序,多洗几次看看。
守候在风中的宁静。
19楼2012-06-04 08:37:03
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普通回帖

xbqewpq

荣誉版主 (著名写手)

魂兮

这种问题很棘手啊,不行就换柱子吧。如果问题得以解决,希望分享下方法。
红颜远,相思苦,几番意,难相付。十年情思百年渡,不斩相思不忍顾!
2楼2012-06-01 18:36:49
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qxie

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
分叉时候减少进样量看看还分不分?
3楼2012-06-01 19:02:07
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我也遇到过 想来可能有两个原因 一个是柱子不行了 另一个是柱子不适合这个体系 比如有次我做溶出 XDB-C18做出来就不分叉 BR-C18就分叉 所以楼主可以考虑换一支柱子来实验一下
4楼2012-06-01 20:00:55
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luwq04

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可能被污染了,可能被污染了,可能被污染了
5楼2012-06-01 21:23:18
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wddmq

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
soundhorizo: 金币+2, 周末愉快 ^^ 2012-06-02 14:00:41
以前也遇到这种情况,也是新买的柱子,同一个品种及方法,开始好好的用了大概一两周,突然就出现肩峰,每个峰都有肩峰,各种方法都试了,结果不行。倒是没敢拆柱子,就是打电话问售后,人家很确定说他们的柱子不会这么容易就塌陷(主要柱压也是一直不高)。于是就推测是柱子污染了。
但是做别的项目还是可以的(就是一些出峰很快的)。
1234
6楼2012-06-02 13:49:12
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zncyet

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
首先考虑样品是否被污染,其次考虑泵是否被堵住(根据泵压变化值--最好稳定)我估计是柱压不稳定造成的
7楼2012-06-02 18:18:06
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梅雨时节

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by zncyet at 2012-06-02 18:18:06
首先考虑样品是否被污染,其次考虑泵是否被堵住(根据泵压变化值--最好稳定)我估计是柱压不稳定造成的

柱压一直很稳定的,偶尔会出现不分叉的时候。
战胜自己,就能战胜未来!
8楼2012-06-02 20:48:05
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梅雨时节

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by wddmq at 2012-06-02 13:49:12
以前也遇到这种情况,也是新买的柱子,同一个品种及方法,开始好好的用了大概一两周,突然就出现肩峰,每个峰都有肩峰,各种方法都试了,结果不行。倒是没敢拆柱子,就是打电话问售后,人家很确定说他们的柱子不会这 ...

像楼主这么说,就只有更换柱子啦?这柱子花了将近5周从美国订购的啊!
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9楼2012-06-02 20:50:10
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梅雨时节

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by luwq04 at 2012-06-01 21:23:18
可能被污染了,可能被污染了,可能被污染了

色谱柱被污染了?但是拆开后,填料并没有变色啊!
战胜自己,就能战胜未来!
10楼2012-06-02 20:51:23
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