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fmtzhangli金虫 (小有名气)
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[求助]
反转录前 DNA 酶消化
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我克隆一段基因大约1800bp，先提取了RNA,RT-PCR测序后，发现含有内含子，可能是DNA污染了，打算用DNA酶消化一下，有没有哪位同学做过类似的实验，具体应该怎么做啊，消化后能不能RNA也降解了？请高手指点~ [ Last edited by fmtzhangli on 2012-5-31 at 11:43 ] |
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【答案】应助回帖
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一个基因的转录产物在不同的发育阶段、分化细胞核生理状态下，通过不同的拼接方式，可以得到不同的mRNA和翻译产物，成为选择性拼接，所产生的多个蛋白质即为同源体。选择性拼接的方式有4种：拼接产物缺失一个或几个外显子；拼接产物保留一个或几个内含子作为外显子的编码序列；外显子中存在5‘拼接点或3’拼接点，从而部分缺失该外显子；内含子中存在5‘或3’拼接点，从而使部分内含子变为编码序列。 以上内容是摘自高等教育出版社出版的《生物化学》第三版，王镜岩等人编写，p484 。 我最近也在做拿真菌里的一个基因做RT-PCR，两次测序结果都有内含子。。。 书上写的貌似存在这种情况，不晓得可不可以直接表达蛋白，会不会影响其功能 |
11楼2013-05-13 13:33:29
caoluoyuan
金虫 (正式写手)
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2楼2012-05-31 11:55:39
3楼2012-05-31 15:44:40
fmtzhangli
金虫 (小有名气)
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4楼2012-06-01 15:23:17