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sunwen1111

银虫 (正式写手)

[求助] 反相柱怎么装柱

从来没使用过反相柱，能否请有经验的人士给讲解下反相柱的装柱，洗脱，一般什么情况下才使用反相柱？
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1楼 2012-05-30 10:04:34
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lizhenlin

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sunwen1111: 金币+2 2012-05-30 16:03:42
新材料的话，先用甲醇或高浓度甲醇水浸泡8~12小时，然后湿法装柱。洗脱一般用甲醇水系统梯度洗脱或者等度洗脱，不过一般先用反相板摸条件。
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没有人会记得你三天前做过什么的
2楼2012-05-30 10:23:25
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dmm1111

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sunwen1111: 金币+2 2012-05-30 16:03:47
一般情况是先把材料浸泡4个小时以上，湿法上柱，所用系统为甲醇-水、乙腈-水，一般式先从含水多的开始走，慢慢加大甲醇的比例，具体情况根据材料分析
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3楼2012-05-30 12:56:50
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acmilan001

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sunwen1111: 金币+2 2012-05-30 16:03:52
装柱？你是指自己填装柱子还是安装柱子到仪器上，自己填的话，分析柱子目前是匀浆法，具体装法是厂家的秘密。不容易找到。如果是安装到仪器上的话，色谱柱上有说明，按照说明做就好了， 主要就是平衡。反相是最常用的模式，70%多的液相分析都用反相模式。如果你是DAC的话，就要装柱机了。具体看情况吧，可以站内联系我。
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4楼2012-05-30 13:57:50
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a21667606

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
sunwen1111: 金币+2 2012-06-02 23:35:32
湿法干法均可，但一定要用甲醇先走一遍再用水置换，一方面可以去除硅胶里面的杂质，另一方面因为直接用水装填的话很容易使硅胶漂浮，柱子填不实。
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5楼2012-06-02 11:07:44
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196399836

新虫 (小有名气)
sunwen1111: 回帖置顶 2012-06-02 23:35:34
甲醇泡8个小时  后按硅胶湿法装柱一样
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6楼2012-06-02 13:40:59
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LXJ-MC

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
karl2100: 金币+1, 谢谢发言！ 2012-06-04 00:37:18
哦?这个要用恒压泵来装柱子呢,你说的是高压制备柱子吧.
若是开口柱子,可以和凝胶一样装好,就是效果不怎么样.需要加压  来压紧才好啊 .
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7楼2012-06-03 16:05:34
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hu_fox

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
sunwen1111: 金币+2 2012-09-04 11:25:07
装柱大家都说过了，我不说了。洗脱的话，有条件可以先用反相板跑板摸条件，如果没有反相板，而你又对自己的样品的极性不太了解，可以先粗略过一次柱子摸条件，从10%甲水一直冲到100%甲醇，当有大量样品被洗脱的时候，这时的这个甲水浓度下一次可以降低10%-20%开始洗脱，且每次加的梯度也可以降低一点，比如从每次加10%降到每次5%。关于反相柱的使用情况，我们实验室的习惯是如果样品包点或样品点分离度较小甚至重叠的时候，用反相柱控制好梯度的话会有较好的分离效果，较粗的反相柱也可用来粗分划段。
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8楼2012-09-04 09:41:13
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ly_tryh

铁杆木虫 (著名写手)
上样一般湿法，用少量初始洗脱机溶解，过滤。
如果样品实在溶解度不好，也用过干法拌样。
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9楼2012-09-04 13:41:58
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