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zgzfei

铁杆木虫 (正式写手)


[交流] 中药单体在大鼠血浆中的代谢产物,LC/PDA/MS检测

我做的是中药异黄酮在大鼠体内代谢,灌胃给药,血浆处理沉淀蛋白和固相萃取都做了,可血浆代谢物在质谱上检不出,只有一个高浓度的代谢产物可以明确检测。选择离子的时候,或者没有峰或者与空白重合。在紫外下经过放大还能看到几个代谢物。有没有哪位高手做过类似的实验,在这里分享下经验吧!
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caicaiseven

银虫 (初入文坛)


★ ★
zgzfei(金币+1): 谢谢参与
leecius: 金币+1, 谢谢! 2012-06-04 09:15:38
不知道楼主用的MS是什么类型的~  
我们实验室在做代谢物推测的时候会用QTRAP~ 一开始会先用MRM的方式,先推测一下可能的代谢物结构及其碎片离子,然后用MRM方式扫描,这种方式的灵敏度很高~ MRM之外就是母离子扫描或者中性丢失扫描了~这个得根据你要测的母药的结构单独讨论。  

还有一点想提醒楼主就是,体内代谢很多会生成二相代谢产物,用质谱检测的时候,需要注意质谱条件,太强烈的质谱条件有可能破坏二相代谢产物……
7楼2012-05-30 09:38:00
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caicaiseven

银虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by zgzfei at 2012-05-30 10:54:57
我用的是Q-TOF没加碰撞能的全扫描模式,可能因为刚用条件不会优化
加上前面的分离也不好。请问什么质谱条件会破坏二相代谢产物呢?...

Q-TOF没用过不太了解,我觉得直接用全扫描模式的话,会有很高的背景峰,有可能淹没比较小的代谢物的峰。

我觉得,做代谢物鉴定,应该是先从结构和代谢途径来推一下可能得代谢产物,然后再想办法把这些代谢产物找出来验证。

此外,我听说有个高分辨质谱是有mass shift扫描的,不知道是哪个牌子了 = =  如果恰好是楼主用的那个,可以试试

比较强烈的质谱条件可能破坏二相代谢产物一般是指高温高电压,有些葡萄糖醛酸化的产物有可能被打回一项产物,不过这个要根据化合物情况讨论……
18楼2012-06-04 15:04:10
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